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蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

[求助] PBI121质粒验证 已有2人参与

我从师兄哪里得了PBI121质粒,但是目的片段P出来的条带不对,一个引物是M13-F,另一个引物是同源臂和M13-R是一样的。结果P出来的条带是1000多,要的是9000多的。
我就觉得质粒可能有问题,进行了HindIII单酶切,和NheI、EcoRI双酶切。单酶切的Marker是15000,切出的条带感觉更接近10000的感觉;双酶切Marker是10000,结果应该是9000多的5000多,切出来也不对。
感觉是这个质粒有问题吧?请问各位有没有PBI121质粒,想求一枚~

PBI121质粒验证
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

9000多想扩出来,不是一般的难啊,我觉得质粒应该没问题,酶切加上你这么大的片段,电泳结果会有误差的,看的不是那么明显。质粒图谱有的话你把M-13上下游扩出来的产物拿去测序,然后比对一下就知道是不是你想要的了

发自小木虫Android客户端
4楼2017-03-04 17:01:34
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蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

还有两张酶切的图不知道怎么发上了
2楼2017-03-04 16:02:23
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蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

是不是质粒太大不适合用酶切和酶连呢
3楼2017-03-04 16:06:06
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


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蜗牛包子: 金币+1 2017-03-05 12:57:26
把质粒寄出去测个序就行了,这个问题得先解决,免得到后边发现不对,白忙活了
···
5楼2017-03-04 18:00:07
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