24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1924  |  回复: 7

蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

[求助] PBI121质粒验证 已有2人参与

我从师兄哪里得了PBI121质粒,但是目的片段P出来的条带不对,一个引物是M13-F,另一个引物是同源臂和M13-R是一样的。结果P出来的条带是1000多,要的是9000多的。
我就觉得质粒可能有问题,进行了HindIII单酶切,和NheI、EcoRI双酶切。单酶切的Marker是15000,切出的条带感觉更接近10000的感觉;双酶切Marker是10000,结果应该是9000多的5000多,切出来也不对。
感觉是这个质粒有问题吧?请问各位有没有PBI121质粒,想求一枚~

PBI121质粒验证
IMG_4408.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

还有两张酶切的图不知道怎么发上了
2楼2017-03-04 16:02:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

是不是质粒太大不适合用酶切和酶连呢
3楼2017-03-04 16:06:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

9000多想扩出来,不是一般的难啊,我觉得质粒应该没问题,酶切加上你这么大的片段,电泳结果会有误差的,看的不是那么明显。质粒图谱有的话你把M-13上下游扩出来的产物拿去测序,然后比对一下就知道是不是你想要的了

发自小木虫Android客户端
4楼2017-03-04 17:01:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
蜗牛包子: 金币+1 2017-03-05 12:57:26
把质粒寄出去测个序就行了,这个问题得先解决,免得到后边发现不对,白忙活了
···
5楼2017-03-04 18:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heiye402

禁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
蜗牛包子: 金币+2, 有帮助 2017-03-05 12:52:11
本帖内容被屏蔽

6楼2017-03-04 19:17:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by heiye402 at 2017-03-04 19:17:23
不知道你这个质粒原本大小是多大,如果很大的话凝胶电泳的胶的分辨率是有范围的,太大的片段就没办法进行大小判断了,你可以找个酶切位点多的酶进行酶切,然后把那些小片段全加起来,看看是不是和理想的一样,如果一 ...

14000多,嗯,我试试这个方法。谢谢
7楼2017-03-05 12:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛包子

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2017-03-04 17:01:34
9000多想扩出来,不是一般的难啊,我觉得质粒应该没问题,酶切加上你这么大的片段,电泳结果会有误差的,看的不是那么明显。质粒图谱有的话你把M-13上下游扩出来的产物拿去测序,然后比对一下就知道是不是你想要的了 ...

之前我反向扩另一个质粒,8000多成功了,我就想试下这个,结果很不理想。M13中间是我不想要的部分。
8楼2017-03-05 12:55:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蜗牛包子 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 电气专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 02:43 by 秋豆菜芽
[考研] 求调剂,262机械专硕 +8 嗯yyl 2026-04-08 8/400 2026-04-12 02:31 by 秋豆菜芽
[考研] 求调剂 +18 MAX怅惘 2026-04-09 20/1000 2026-04-11 23:31 by zhen~
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +11 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 12/600 2026-04-11 11:08 by zhq0425
[考研] 求调剂 +6 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:55 by zhq0425
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 一志愿沪9,326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 277求调剂 +19 倪建设 2026-04-06 19/950 2026-04-10 09:24 by guosr9609
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 材料求调剂 +18 一样YWY 2026-04-05 18/900 2026-04-07 15:49 by dxlg
[考研] 信工所11408 340分 本科西安交大自动化 +3 moontrek 2026-04-06 3/150 2026-04-07 09:56 by chongya
[考研] 285求调剂 +5 mapmath 2026-04-06 6/300 2026-04-06 17:18 by 蓝云思雨
[考研] (调剂)一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 326求调剂 +3 顾若浮生 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:32 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见