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叹汁杰

新虫 (初入文坛)

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[交流] race全长克隆为什么要做in-fusion

我用的是TAKARA smart race，做全长克隆，我有点不明白的是，为什么不能直接在胶回收那一步去测序获得3端或5端序列，而还要做in-fusion克隆后再转入感受态细胞，再提取质粒测序。。有路过的大神一语道破吗

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1楼2017-03-02 20:24:01

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acj08010201

新虫 (初入文坛)

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★
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引用回帖:

4楼: Originally posted by 方天翼614 at 2017-04-09 12:10:43
因为pcr扩增过程中仍然存在一定错配率，克隆到大肠杆菌后，大肠杆菌的扩增错配率相对低得多。
2.PCR产物回收过程中可能会存在其他的杂带，
3.克隆之后，可以看看是否克隆到大肠杆菌，以防测序是空载

in-fusion不用试剂盒里提供的酶用诺唯赞公司提供的in-fusion酶可以吗