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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » race全长克隆为什么要做in-fusion
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叹汁杰

新虫 (初入文坛)

[交流] race全长克隆为什么要做in-fusion

我用的是TAKARA smart race，做全长克隆，我有点不明白的是，为什么不能直接在胶回收那一步去测序获得3端或5端序列，而还要做in-fusion克隆后再转入感受态细胞，再提取质粒测序。。有路过的大神一语道破吗

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1楼 2017-03-02 20:24:01
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方天翼614

新虫 (小有名气)
★
叹汁杰(金币+3): 谢谢参与
因为pcr扩增过程中仍然存在一定错配率，克隆到大肠杆菌后，大肠杆菌的扩增错配率相对低得多。
2.PCR产物回收过程中可能会存在其他的杂带，
3.克隆之后，可以看看是否克隆到大肠杆菌，以防测序是空载
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4楼2017-04-09 12:10:43
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Hey Daring

新虫 (正式写手)
★
叹汁杰(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by 方天翼614 at 2017-04-09 12:10:43
因为pcr扩增过程中仍然存在一定错配率，克隆到大肠杆菌后，大肠杆菌的扩增错配率相对低得多。
2.PCR产物回收过程中可能会存在其他的杂带，
3.克隆之后，可以看看是否克隆到大肠杆菌，以防测序是空载

关于RACE可以深入交流下么

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5楼2017-05-26 17:42:47
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渊博震天

版主 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问这个试剂盒价格多少呢？

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王查查23
6楼2017-05-27 17:09:38
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王查查23

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
7楼2017-05-28 23:53:07
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王查查23

禁虫 (小有名气)
送红花一朵
本帖内容被屏蔽
8楼2017-05-28 23:53:27
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小迟儿

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 王查查23 at 2017-05-28 23:53:27
差不多5K
...

800rmb一个反应左右

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9楼2017-06-24 01:11:58
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acj08010201

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 方天翼614 at 2017-04-09 12:10:43
因为pcr扩增过程中仍然存在一定错配率，克隆到大肠杆菌后，大肠杆菌的扩增错配率相对低得多。
2.PCR产物回收过程中可能会存在其他的杂带，
3.克隆之后，可以看看是否克隆到大肠杆菌，以防测序是空载

in-fusion不用试剂盒里提供的酶用诺唯赞公司提供的in-fusion酶可以吗
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10楼2017-10-23 09:41:38
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yinzqllll

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也想问如果克隆测序的话只能用in-fusion克隆吗，不能连接普通的t载体吗
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11楼2018-03-13 17:07:15
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syhorchid2楼
2017-03-02 21:01   回复  
叹汁杰(金币+3): 谢谢参与
syhorchid3楼
2017-03-02 21:01   回复  
叹汁杰(金币+3): 谢谢参与
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