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叹汁杰

新虫 (初入文坛)

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[交流] race全长克隆为什么要做in-fusion

我用的是TAKARA smart race，做全长克隆，我有点不明白的是，为什么不能直接在胶回收那一步去测序获得3端或5端序列，而还要做in-fusion克隆后再转入感受态细胞，再提取质粒测序。。有路过的大神一语道破吗

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1楼 2017-03-02 20:24:01

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方天翼614

新虫 (小有名气)

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★
叹汁杰(金币+3): 谢谢参与

因为pcr扩增过程中仍然存在一定错配率，克隆到大肠杆菌后，大肠杆菌的扩增错配率相对低得多。
2.PCR产物回收过程中可能会存在其他的杂带，
3.克隆之后，可以看看是否克隆到大肠杆菌，以防测序是空载

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4楼2017-04-09 12:10:43

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Hey Daring

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★
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4楼: Originally posted by 方天翼614 at 2017-04-09 12:10:43
因为pcr扩增过程中仍然存在一定错配率，克隆到大肠杆菌后，大肠杆菌的扩增错配率相对低得多。
2.PCR产物回收过程中可能会存在其他的杂带，
3.克隆之后，可以看看是否克隆到大肠杆菌，以防测序是空载

关于RACE可以深入交流下么

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5楼2017-05-26 17:42:47

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