24小时热门版块排行榜    

查看: 4289  |  回复: 21
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

新人求帮助

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于诱导表达问题 已有6人参与

重组菌诱导表达后跑蛋白电泳,结果如下图。从左到右依次为maker、重组菌上清、重组菌沉淀、空菌上清和沉淀
重组载体为bl-21-pet-28a,带his-tag,诱导温度为16度,时间16小时左右
用16度诱导是看别人说低温诱导有助于蛋白的正确折叠,可是我这怎么全是包涵体
希望有人能帮我解惑!!!!!!!!!!!!

关于诱导表达问题
H5`P@E1P4E2C}GL@ZV$%R%B.png
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寥落星晨

木虫 (小有名气)

20楼2017-02-16 13:37:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

seascen2016

新虫 (小有名气)

这个跟蛋白本身性质有关,有的就容易产生包涵体,楼主可以试试少加点诱导剂再试试

发自小木虫Android客户端
2楼2017-02-14 16:11:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

栾栾silence

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-02-15 07:52:41
并不是所有的原核表达蛋白都会分泌表达的,有的就是会形成包涵体,看到你的上清中其实也含有一点目的蛋白,你可以将菌体多超声,多裂解,使其充分裂解,然后只要上清中的目的蛋白,也可以就这样按照包涵体蛋白的提取方法来做。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

怀挺!
3楼2017-02-14 16:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

新人求帮助

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 栾栾silence at 2017-02-14 16:28:56
并不是所有的原核表达蛋白都会分泌表达的,有的就是会形成包涵体,看到你的上清中其实也含有一点目的蛋白,你可以将菌体多超声,多裂解,使其充分裂解,然后只要上清中的目的蛋白,也可以就这样按照包涵体蛋白的提取 ...

超声时间过长不是会使蛋白变性吗?这样不会影响酶活性的测定吗
4楼2017-02-14 16:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见