24小时热门版块排行榜    

查看: 2227  |  回复: 28

momimiao

新虫 (初入文坛)

[交流] pcr扩不出来 怀疑模板问题 求助 已有19人参与

用试剂盒提取的DNA进行pcr扩不出来 怀疑是模板问题 尝试多加一点DNA还是不行 可能DNA里有抑制作用 现在打算减少模板量来试一试 但是DNA浓度测出来很低 最低的4ng/ul 想知道DNA模板最少的用量是多少啊
回复此楼
╮(╯_╰)╭
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

后来银河

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
4ng差不多就算是没有提出来了

发自小木虫Android客户端
9楼2017-01-16 10:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

momimiao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 山威研发 at 2017-01-15 20:26:55
怎么不做菌液PCR,4ng太低了。可以说是误差引起的,没有模板DNA,所以P不出。

因为做的就是沉积物样品啊_(:зゝ∠)_  试着把DNA加到了3微升 还是不行 不知道是不是模板不纯的原因
╮(╯_╰)╭
3楼2017-01-15 20:40:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

山威研发

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-16 08:07:39
怎么不做菌液PCR,4ng太低了。可以说是误差引起的,没有模板DNA,所以P不出。

发自小木虫Android客户端
2楼2017-01-15 20:26:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muncheng

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引物有没有问题啊,反应体系再检查检查

发自小木虫Android客户端
4楼2017-01-15 22:19:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西西sm

新虫 (正式写手)

5楼2017-01-15 23:15:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kunkuncow

新虫 (小有名气)

方式分额
6楼2017-01-16 00:14:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cry_2013

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-21 06:46:10
一个是确定模板质量,二是确定引物没问题,感觉引物对PCR的扩增影响很大,引物对了,退火问题有波动也能扩出来
7楼2017-01-16 09:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

妞—潇洒

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-21 06:46:46
引物的问题吧 引物好用的话 即使模版浓度在ng的下一个数量级都一样能P出来 其实浓度对扩增的影响不大的

发自小木虫IOS客户端
我只管面朝大海,龇牙咧嘴,至于花爱开不开
8楼2017-01-16 09:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

momimiao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by muncheng at 2017-01-15 22:19:08
引物有没有问题啊,反应体系再检查检查

引物是公司提供的 有的样品做出来了 有的没做出来 所以怀疑是不是模板的问题
╮(╯_╰)╭
10楼2017-01-16 18:39:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 momimiao 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 WqtG0Aem8Ufl 2026-10-24 5/250 2026-10-26 02:55 by cLOojpOxkX0G
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 5/250 2026-10-26 02:12 by cLOojpOxkX0G
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 3xN9SualEUPt 2026-10-24 4/200 2026-10-26 02:03 by cLOojpOxkX0G
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 DI1qFHFK0KbE 2026-10-24 3/150 2026-10-26 01:37 by cLOojpOxkX0G
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 DI1qFHFK0KbE 2026-10-24 5/250 2026-10-26 01:33 by cLOojpOxkX0G
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 DI1qFHFK0KbE 2026-10-24 4/200 2026-10-26 01:24 by cLOojpOxkX0G
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 11/550 2026-10-26 00:47 by cLOojpOxkX0G
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 5/250 2026-10-26 00:41 by cLOojpOxkX0G
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 9/450 2026-10-26 00:34 by cLOojpOxkX0G
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 9/450 2026-10-26 00:28 by cLOojpOxkX0G
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 5/250 2026-10-26 00:19 by cLOojpOxkX0G
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 GVGRDgNfv7P4 2026-10-23 10/500 2026-10-26 00:15 by cLOojpOxkX0G
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WqtG0Aem8Ufl 2026-10-24 3/150 2026-10-25 20:11 by cLOojpOxkX0G
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 8/400 2026-10-25 12:59 by XiYP04It3Evb
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-24 4/200 2026-10-25 01:22 by XcOYG53d3x4p
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 8/400 2026-10-25 00:15 by XcOYG53d3x4p
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 7xHjyB3bAiwg 2026-10-23 11/550 2026-10-24 23:35 by XcOYG53d3x4p
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7xHjyB3bAiwg 2026-10-24 3/150 2026-10-24 15:41 by Equinoxhua
[考博] 27秋申博自荐 +4 且听风吟时 2026-10-21 4/200 2026-10-23 13:26 by 大大大肥虫
[考博] 郑州大学申博 +5 stars~ 2026-10-19 8/400 2026-10-22 15:06 by stars~
信息提示
请填处理意见