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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 询问有关引物设计方面的问题
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贺夏

金虫 (小有名气)

[交流] 询问有关引物设计方面的问题

问有关引物设计方面的问题？
（1）请问引物的Tm值及GC含量的计算是用已经加了酶切位点及保护碱基的引物来计算吗？
（2）所说的引物长度也包含了酶切位点及保护碱基吗？
（3）kozak序列加在引物的什么位置？上下游引物都需要加kozak序列吗？
（4）酶切位点的保护碱基是要在酶切位点两端都要加吗？
请大家帮忙解答一下，谢谢！

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1楼 2017-01-01 18:49:15
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1/2，是的，都包含酶切位点和保护碱基。3就我所知是只加在上游，ATG前段。4没看懂你的意思，仅仅是酶切位点两端吗？

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8楼2017-01-01 22:18:41
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贺夏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 我爱chi辣椒 at 2017-01-01 22:18:41
1/2，是的，都包含酶切位点和保护碱基。3就我所知是只加在上游，ATG前段。4没看懂你的意思，仅仅是酶切位点两端吗？

是的

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9楼2017-01-01 22:22:46
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贺夏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 贺夏 at 2017-01-01 22:22:46
是的
...

谢谢

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10楼2017-01-01 22:22:56
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贺夏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 贺夏 at 2017-01-01 22:22:46
是的
...

你好，我还想问一下，kozak序列是不是在计算引物长度与Tm值与GC含量时也算在其中？谢谢

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11楼2017-01-01 22:25:32
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