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逗逼庄庄
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稳定表达亚细胞定位
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我的基因大概有3000+,用的是gateway技术构建了一个带egfp的融合载体,35s-cds-egfp。该载体已经转化栽培种烟草,在dna,rna水平上都验证阳性的植物,去观察gfp荧光,结果什么都看不到,也做过瞬间表达本氏烟草,也是没有荧光,试了两个不同的gfp融合载体,个一个yfp融合载体,都是没有荧光。请问这是怎么回事?该如何解决这种问题。
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2017-01-01 21:59:37
1 检查序列是否正确
2 考虑蛋白结构,是否荧光蛋白应该连在另外一端
3 准备一个阳性对照,看看侵染以后是否有荧光
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼
:
Originally posted by
starseacow
at 2017-01-01 16:35:10
1 检查序列是否正确
2 考虑蛋白结构,是否荧光蛋白应该连在另外一端
3 准备一个阳性对照,看看侵染以后是否有荧光
序列测序都正确,也能翻译成氨基酸,别人跟我用同一个载体,同时做,他的有荧光,现在在尝试构建35s-gfp-cds,试一下
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2017-01-02 13:01:40
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专业: 作物分子育种
叶绿体自发荧光能看到吗?
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首先是目的基因后的终止密码子有没有去掉,读码框是否发生了改变,再者就要考虑你的基因可能不表达。
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专业: 法学
我们可以提供亚细胞定位技术服务
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验证基因是否表达只能做western吗
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2017-02-27 20:53:16
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我也有个基因一直没有荧光
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2017-02-27 20:53:45
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