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jinshengfang

木虫 (正式写手)

[交流] pET28a空质粒双酶切出现两条带 已有5人参与

我的pET28a质粒利用NdeI和XhoI双酶切,出现两条带,这是怎么回事?
第一是marker 5000bp
第二条带 pET28a酶切前
第三 pET28a酶切后

pET28a空质粒双酶切出现两条带
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生物催化
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阿门阿前1991

金虫 (小有名气)


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送红花一朵
可能没有酶切完,时间延长一点试试。
总会出现一个温柔的人,让你变得温暖,然后默默离开。
6楼2016-12-30 08:56:25
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四月无央

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道为什么你的图片看不了大图,首先pET-28a是5.4kb,如果有大一点的marker,下次还是换一个大一点,10kb marker应该很常见。然后,质粒带像酶切或的,未酶切的质粒应该是会出现三条带。然后,这两个酶切位点在多克隆位点两端,会将多克隆位点切下,好像还会切下一条his尾巴,所以可能上面一条只有单切。NdeI的酶不知道你用的那个公司的,我一直感觉这个酶活性不是很高,建议实验时,先用NdeI单切,然后胶回收,然后再XhoI切,但这样你出发的质粒量要大一点。

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2楼2016-12-28 20:18:52
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stevenshi021

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没有酶切干净,最好跑长时间分离

发自小木虫Android客户端
3楼2016-12-28 23:08:23
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轩云飞

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第三条有可能是没完全切吧

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4楼2016-12-29 10:39:42
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