| 查看: 4315 | 回复: 5 | |||
jinshengfang木虫 (正式写手)
|
[交流]
pET28a空质粒双酶切出现两条带 已有5人参与
|
|
我的pET28a质粒利用NdeI和XhoI双酶切，出现两条带，这是怎么回事？ 第一是marker 5000bp 第二条带 pET28a酶切前 第三 pET28a酶切后  上传.png |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
阿门阿前1991» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有244人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于构建pET28a载体转化后IPTG诱导跑SDS-PAGE胶问题。
已经有25人回复
四月无央
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1552.2
- 散金: 153
- 红花: 3
- 帖子: 89
- 在线: 126.2小时
- 虫号: 3899663
- 注册: 2015-05-30
- 专业: 微生物生理与生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
不知道为什么你的图片看不了大图，首先pET-28a是5.4kb，如果有大一点的marker，下次还是换一个大一点，10kb marker应该很常见。然后，质粒带像酶切或的，未酶切的质粒应该是会出现三条带。然后，这两个酶切位点在多克隆位点两端，会将多克隆位点切下，好像还会切下一条his尾巴，所以可能上面一条只有单切。NdeI的酶不知道你用的那个公司的，我一直感觉这个酶活性不是很高，建议实验时，先用NdeI单切，然后胶回收，然后再XhoI切，但这样你出发的质粒量要大一点。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-12-28 20:18:52
stevenshi021
新虫 (小有名气)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 545.3
- 红花: 5
- 帖子: 276
- 在线: 35.1小时
- 虫号: 2272292
- 注册: 2013-02-03
- 专业: 生物化学
3楼2016-12-28 23:08:23
4楼2016-12-29 10:39:42
5楼2016-12-29 15:54:27
6楼2016-12-30 08:56:25
20