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jinshengfang木虫 (正式写手)
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[交流]
pET28a空质粒双酶切出现两条带 已有5人参与
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我的pET28a质粒利用NdeI和XhoI双酶切，出现两条带，这是怎么回事？ 第一是marker 5000bp 第二条带 pET28a酶切前 第三 pET28a酶切后  上传.png |
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5楼2016-12-29 15:54:27
四月无央
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不知道为什么你的图片看不了大图，首先pET-28a是5.4kb，如果有大一点的marker，下次还是换一个大一点，10kb marker应该很常见。然后，质粒带像酶切或的，未酶切的质粒应该是会出现三条带。然后，这两个酶切位点在多克隆位点两端，会将多克隆位点切下，好像还会切下一条his尾巴，所以可能上面一条只有单切。NdeI的酶不知道你用的那个公司的，我一直感觉这个酶活性不是很高，建议实验时，先用NdeI单切，然后胶回收，然后再XhoI切，但这样你出发的质粒量要大一点。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-12-28 20:18:52
stevenshi021
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3楼2016-12-28 23:08:23
4楼2016-12-29 10:39:42