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w雨过天晴j

新虫 (初入文坛)

[求助] Western blot目的条带上有竖着的杂带 已有1人参与

如图所示第一行的条带，有竖着的杂带，请问是什么原因导致的？第一张的图的第一行条带和第二张图的第一行条带，是不同小鼠的同一种组织样本，上样量差不多都是20几微克，还有一点就是一个是十孔一个15孔胶，我想问是什么原因导致的带型差异较大，第一个比较清晰，第二个比较杂乱，是提蛋白样品的原因？还是跟多少孔胶有关系？

Western blot目的条带上有竖着的杂带


Western blot目的条带上有竖着的杂带-1


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1楼 2016-12-27 01:04:32
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peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个应该算是跑胶拖尾现象，原因其实挺多，需要你分析一下你这个属于哪种情况。1. 蛋白浓度测定不准，导致上样量过大，可以降低上样量看看，改为15μg上样 2 电压过高，导致跑胶过快，温度过高也是同理，会导致拖尾  3 蛋白要充分变性然后上样  4 蛋白上样要充分离心，然后取上清上样，如果混有杂质，也会导致蛋白出现拖尾现象。你可以尝试从这几个方面找找，看看是不是哪里没有注意到，这些原因也仅供你参考，其深层的原因还需要你自己去分析。
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2楼2016-12-30 08:39:00
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star013

新虫 (知名作家)
我们可以做wb技术服务哈

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3楼2016-12-30 09:27:44
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w雨过天晴j

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-30 08:39:00
你这个应该算是跑胶拖尾现象，原因其实挺多，需要你分析一下你这个属于哪种情况。1. 蛋白浓度测定不准，导致上样量过大，可以降低上样量看看，改为15μg上样 2 电压过高，导致跑胶过快，温度过高也是同理，会导致拖 ...

下面的条带都是同样的样本，只是不同的抗体，只有最上面的那个抗体才会出现这种拖带的现象。

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4楼2016-12-30 10:18:16
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东村以东

新虫 (初入文坛)
你好，请问你找到原因了吗？我也有同样的问题，一张膜上就一个蛋白出现孔两边长长的拖带。怀疑是这个蛋白可以和某种不同大小碎片的东西结合了。你做的什么蛋白？

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5楼2017-03-23 20:00:17
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fuyue6521

禁虫 (初入文坛)
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6楼2017-04-19 13:34:38
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