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谁会，想请教
最近做pcr扩增，之前用一家公司的酶扩出来了，因为东西没了，就换了takara的，可是，怎么也扩不出来，就算扩出，条带特别浅，该怎么办［大哭］
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baichi121234
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baichi121234
at 2016-12-22 14:33:18
该延期了
但愿不要，太痛苦
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2016-12-22 14:35:46
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我只想说takara的酶是真的不太好用，谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增，或者干脆换支好点儿的酶，来扩一下。
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2016-12-22 14:49:32
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换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次
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2016-12-22 15:18:23
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peitaokong
at 2016-12-22 14:49:32
我只想说takara的酶是真的不太好用，谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增，或者干脆换支好点儿的酶，来扩一下。
两步法？为什么？
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6楼
2016-12-22 15:58:12
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Originally posted by
bush119
at 2016-12-22 15:18:23
换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次
我在找退火温度，也在看takara的这套东西能不能扩出条带，因为我有好多样，我还要大量扩
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2016-12-22 16:00:30
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Takara有好的酶也有差的。
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2016-12-22 16:14:20
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可能是酶的缓冲液成分不同？我看过文献说不同公司的酶在相同条件下扩增效果不同
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