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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 谁会，想请教
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斑点windy

铁虫 (著名写手)

[交流] 谁会，想请教

最近做pcr扩增，之前用一家公司的酶扩出来了，因为东西没了，就换了takara的，可是，怎么也扩不出来，就算扩出，条带特别浅，该怎么办［大哭］

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1楼 2016-12-22 14:26:42
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baichi121234

禁虫 (职业作家)
本帖内容被屏蔽
2楼2016-12-22 14:33:18
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斑点windy

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by baichi121234 at 2016-12-22 14:33:18
该延期了

但愿不要，太痛苦

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3楼2016-12-22 14:35:46
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peitaokong

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
斑点windy: 金币+1 2016-12-22 15:58:22
我只想说takara的酶是真的不太好用，谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增，或者干脆换支好点儿的酶，来扩一下。
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4楼2016-12-22 14:49:32
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bush119

木虫 (职业作家)

灌水高手
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
斑点windy: 金币+1 2016-12-22 15:58:43
换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次
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5楼2016-12-22 15:18:23
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斑点windy

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-22 14:49:32
我只想说takara的酶是真的不太好用，谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增，或者干脆换支好点儿的酶，来扩一下。

两步法？为什么？

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6楼2016-12-22 15:58:12
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斑点windy

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bush119 at 2016-12-22 15:18:23
换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次

我在找退火温度，也在看takara的这套东西能不能扩出条带，因为我有好多样，我还要大量扩

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7楼2016-12-22 16:00:30
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mlxmiao

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Takara有好的酶也有差的。

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8楼2016-12-22 16:14:20
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sukino

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
斑点windy: 金币+1 2016-12-22 17:32:07
可能是酶的缓冲液成分不同？我看过文献说不同公司的酶在相同条件下扩增效果不同

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9楼2016-12-22 16:22:44
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纳米材料753
10楼2016-12-22 16:30:27
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