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最近做pcr扩增,之前用一家公司的酶扩出来了,因为东西没了,就换了takara的,可是,怎么也扩不出来,就算扩出,条带特别浅,该怎么办[大哭]
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baichi121234
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baichi121234
at 2016-12-22 14:33:18
该延期了
但愿不要,太痛苦
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2016-12-22 14:35:46
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我只想说takara的酶是真的不太好用,谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增,或者干脆换支好点儿的酶,来扩一下。
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2016-12-22 14:49:32
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换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次
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2016-12-22 15:18:23
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4楼
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peitaokong
at 2016-12-22 14:49:32
我只想说takara的酶是真的不太好用,谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增,或者干脆换支好点儿的酶,来扩一下。
两步法?为什么?
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6楼
2016-12-22 15:58:12
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Originally posted by
bush119
at 2016-12-22 15:18:23
换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次
我在找退火温度,也在看takara的这套东西能不能扩出条带,因为我有好多样,我还要大量扩
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2016-12-22 16:00:30
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Takara有好的酶也有差的。
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2016-12-22 16:14:20
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可能是酶的缓冲液成分不同?我看过文献说不同公司的酶在相同条件下扩增效果不同
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9楼
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