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斑点windy

铁虫 (著名写手)

[交流] 谁会,想请教

最近做pcr扩增,之前用一家公司的酶扩出来了,因为东西没了,就换了takara的,可是,怎么也扩不出来,就算扩出,条带特别浅,该怎么办[大哭]

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斑点windy

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-22 16:51:59
你不是说你能够扩出比较弱的条带。你可以采用两步法,第一步可以设置25个循环,然后用第一步的PCR产物为模板,然后再扩增第二次循环可以设置为30或者35个循环。这样起着富集模板的作用。可以针对基因丰度低的情况, ...

嗯,我懂你的意思了,这也是加大产量的方法,但是,我现在只是摸索条件,就是设置了温度梯度,如果现在用两步法,我还有大量的样,那些该怎么办呢?万一有的样一点没有条带,怎么办呢?

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16楼2016-12-22 17:39:21
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baichi121234

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

2楼2016-12-22 14:33:18
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斑点windy

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by baichi121234 at 2016-12-22 14:33:18
该延期了

但愿不要,太痛苦

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3楼2016-12-22 14:35:46
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peitaokong

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
斑点windy: 金币+1 2016-12-22 15:58:22
我只想说takara的酶是真的不太好用,谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增,或者干脆换支好点儿的酶,来扩一下。
4楼2016-12-22 14:49:32
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