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斑点windy

铁虫 (著名写手)

[交流] 谁会,想请教

最近做pcr扩增,之前用一家公司的酶扩出来了,因为东西没了,就换了takara的,可是,怎么也扩不出来,就算扩出,条带特别浅,该怎么办[大哭]

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baichi121234

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

2楼2016-12-22 14:33:18
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斑点windy

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by baichi121234 at 2016-12-22 14:33:18
该延期了

但愿不要,太痛苦

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3楼2016-12-22 14:35:46
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peitaokong

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
斑点windy: 金币+1 2016-12-22 15:58:22
我只想说takara的酶是真的不太好用,谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增,或者干脆换支好点儿的酶,来扩一下。
4楼2016-12-22 14:49:32
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bush119

木虫 (职业作家)

灌水高手

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
斑点windy: 金币+1 2016-12-22 15:58:43
换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次
5楼2016-12-22 15:18:23
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斑点windy

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-22 14:49:32
我只想说takara的酶是真的不太好用,谁用谁知道。你可以尝试下两步法扩增,或者干脆换支好点儿的酶,来扩一下。

两步法?为什么?

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6楼2016-12-22 15:58:12
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斑点windy

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by bush119 at 2016-12-22 15:18:23
换反应条件呗 每种酶的最适条件未必都一样
想要富集扩增产物就把那个浅浅的条带切下来回收 做为模板 再扩一次

我在找退火温度,也在看takara的这套东西能不能扩出条带,因为我有好多样,我还要大量扩

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7楼2016-12-22 16:00:30
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mlxmiao

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Takara有好的酶也有差的。

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8楼2016-12-22 16:14:20
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sukino

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
斑点windy: 金币+1 2016-12-22 17:32:07
可能是酶的缓冲液成分不同?我看过文献说不同公司的酶在相同条件下扩增效果不同

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9楼2016-12-22 16:22:44
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10楼2016-12-22 16:30:27
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