24小时热门版块排行榜    

查看: 1648  |  回复: 11

卢家彬

木虫 (小有名气)

[交流] 奇葩的PCR退火温度的设置 已有6人参与

最近在看文献的时候发现一篇文章的PCR程序设计如下:
1×:92°C  3min.
7×:92°C  1min, 63°C  30s,58°C  50s,72°C 1min.
23×:92°C  1min, 63°C  30s,72°C  1min.
请问7×:92°C  1min, 63°C  30s,58°C  50s,72°C 1min中的63°C  30s,58°C  50s设置寓意是什麽?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Neo2000

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kuaile5420: 金币+1, 欢迎交流 2016-12-08 21:11:55
少见则多怪,这样设置的目的只不过让退火更高效而已,其实引物设计的好,完全不必如此,三阶即可

发自小木虫Android客户端
6楼2016-12-05 21:05:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

月夜鸣鸣

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
该体系中是否含不同退火温度的多对引物??

发自小木虫Android客户端
2楼2016-12-05 14:35:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ailee桑卡娜

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
设置的梯度吗?如果是梯度的话时间应该一样啊

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-12-05 16:53:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Assistover

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
会不会是为了提高引物扩增条带的可能性?

发自小木虫Android客户端
4楼2016-12-05 17:14:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

salvador2010

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是Step down 循环,参见KOD
5楼2016-12-05 20:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haimingcai

铜虫 (小有名气)

天天向上
7楼2016-12-06 09:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 月夜鸣鸣 at 2016-12-05 14:35:27
该体系中是否含不同退火温度的多对引物??

10多对引物
8楼2016-12-06 10:04:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by haimingcai at 2016-12-06 09:16:24
看着像降落PCR

不是touch down
9楼2016-12-06 10:05:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Neo2000 at 2016-12-05 21:05:13
少见则多怪,这样设置的目的只不过让退火更高效而已,其实引物设计的好,完全不必如此,三阶即可

我也这么认为的,因为有很多引物对,效果如何我准备验证一下
10楼2016-12-06 10:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 卢家彬 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-31 02:13 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-31 01:51 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 6/300 2026-08-31 01:48 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-31 01:05 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-31 00:42 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 12/600 2026-08-31 00:34 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 15/750 2026-08-31 00:10 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:57 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:48 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 17:25 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 面上意见出来了 +9 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 18/900 2026-08-30 16:47 by 黄鸟于飞Chao
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
信息提示
请填处理意见