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卢家彬

木虫 (小有名气)

[交流] 奇葩的PCR退火温度的设置 已有6人参与

最近在看文献的时候发现一篇文章的PCR程序设计如下:
1×:92°C  3min.
7×:92°C  1min, 63°C  30s,58°C  50s,72°C 1min.
23×:92°C  1min, 63°C  30s,72°C  1min.
请问7×:92°C  1min, 63°C  30s,58°C  50s,72°C 1min中的63°C  30s,58°C  50s设置寓意是什麽?
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Neo2000

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kuaile5420: 金币+1, 欢迎交流 2016-12-08 21:11:55
少见则多怪,这样设置的目的只不过让退火更高效而已,其实引物设计的好,完全不必如此,三阶即可

发自小木虫Android客户端
6楼2016-12-05 21:05:13
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普通回帖

月夜鸣鸣

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
该体系中是否含不同退火温度的多对引物??

发自小木虫Android客户端
2楼2016-12-05 14:35:27
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Ailee桑卡娜

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
设置的梯度吗?如果是梯度的话时间应该一样啊

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-12-05 16:53:04
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Assistover

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
会不会是为了提高引物扩增条带的可能性?

发自小木虫Android客户端
4楼2016-12-05 17:14:37
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salvador2010

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是Step down 循环,参见KOD
5楼2016-12-05 20:57:38
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haimingcai

铜虫 (小有名气)

天天向上
7楼2016-12-06 09:16:24
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卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 月夜鸣鸣 at 2016-12-05 14:35:27
该体系中是否含不同退火温度的多对引物??

10多对引物
8楼2016-12-06 10:04:01
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卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by haimingcai at 2016-12-06 09:16:24
看着像降落PCR

不是touch down
9楼2016-12-06 10:05:26
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卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Neo2000 at 2016-12-05 21:05:13
少见则多怪,这样设置的目的只不过让退火更高效而已,其实引物设计的好,完全不必如此,三阶即可

我也这么认为的,因为有很多引物对,效果如何我准备验证一下
10楼2016-12-06 10:06:34
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