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Crispr载体构建的问题求指教
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在构建crispr载体时， 20bp的选择要求序列后面有个PAM序列，即NGG。 而在设计sgRNA时，会有正义链和反义链，那么反义链就是CCN后面跟着20bp. 麻烦问下各位，这里的正义链和反义链有差别吗？会对突变效果有影响吗？ 另外把反义链接入载体里面时，是不是还要反向互补过来，将反义链的互补序列连入载体的正向序列里？ 刚开始做crispr,求指导。 |
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