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JamesZu铁杆木虫 (著名写手)
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[求助]
各位大侠CRISPP载体连接问题请教，线上等候…… 已有2人参与
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各位大侠，最近做CRISPR载体构建，就是将自己设计好的20bp敲除位点连接到酶切后的CRISPR 15k的大载体上。提出的质粒，酶切后电泳，以及连接中的电泳图见下。连接体系为6微升，2微升的切胶回收载体（约20ng），1微升oligo及3微升solution I。只是做了几遍平板上总长不出阳性菌：要不一块板一个菌不长，要不长一两个。一鉴定又都不是阳性菌，苦恼中……望各位大侠不吝赐教！！！ Linking.jpg（连接24h取1微升电泳）  NCRISPR.jpg（切胶回收后及合成的oligo）  plasmid.jpg(切胶前质粒电泳) |
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JamesZu
铁杆木虫 (著名写手)
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