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dsten

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-20 22:58:53
我做菌液PCR的时候都是用的扩大培养之后的菌液  也不管菌多不多,反正在里面,不用像你们那样挑菌,每次扩出来的结果和提质粒扩的结果是类似的,所以楼主不用太关注在板子上挑菌来P的问题,那菌万一还有用呢  是吧,先扩大培养。

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希望科研上有所建树,play science and make some interesting findings
31楼2016-11-18 13:31:48
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hattie919822

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-20 22:57:09
一般我都是在超净工作台里面,用10微升的墙头将菌落挑进去10微升的无菌水里面,混匀,肉眼可看见稍微浑浊,然后取1微升作为模板。
不见不知不伴不惜不
32楼2016-11-18 16:52:52
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鱼》

新虫 (正式写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2017-01-12 08:23:37
不要浓度过高,不然不容易p

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33楼2016-11-18 17:10:24
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y383514131

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
31楼: Originally posted by dsten at 2016-11-18 13:31:48
我做菌液PCR的时候都是用的扩大培养之后的菌液  也不管菌多不多,反正在里面,不用像你们那样挑菌,每次扩出来的结果和提质粒扩的结果是类似的,所以楼主不用太关注在板子上挑菌来P的问题,那菌万一还有用呢  是吧, ...

谢谢指教

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此事说来终觉浅,莫问出处便是真
34楼2016-11-19 13:40:39
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察亚平

新虫 (小有名气)

可以先扩增一下,划个patch

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快乐每一天
35楼2016-11-20 18:36:53
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siyuansing

银虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-20 23:00:20
我都是挑菌到400ul的LB里,取1ul当做模板进行PCR,剩下的在37度培养。菌液PCR能做出来的再在试管培养,保种测序。菌液PCR能做出来的都有,做不出来的都没有。

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36楼2016-11-20 22:07:42
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caiying888

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

将你培养的菌落离心,去掉一半的上层培养液,再混匀,浓度高点再PCR,
37楼2016-11-21 11:10:31
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xiaominzheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-23 22:03:39
看大家好多都是用的枪头挑菌,小建议:用牙签的尖尖沾一下确定碰着菌就好,然后抖两下就可以了。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

38楼2016-11-22 22:31:09
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y383514131

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
38楼: Originally posted by xiaominzheng at 2016-11-22 22:31:09
看大家好多都是用的枪头挑菌,小建议:用牙签的尖尖沾一下确定碰着菌就好,然后抖两下就可以了。

格兰仕阳性菌也这么做吗

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此事说来终觉浅,莫问出处便是真
39楼2016-11-23 09:36:18
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-17 21:28:38
取单克隆到500UL LB里边儿摇3-4个小时,也可以多摇一会,浑浊了之后,在无菌工作台往10uL的体系里加1uL做PCR即可
40楼2016-11-23 12:24:49
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