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求助各位大神样品分离问题 已有2人参与
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各位大神，我有一个样品k6，样品量只有几十毫克，点板是两个点，可做HPLC却显示一个很好看的单峰，用甲醇水或乙腈水都丝毫分不开，紫外下无斑点，香草醛硫酸显色后为蓝绿色，有没有什么办法能把这两个点分开？小女感激不尽   @lifeliuyan 发自小木虫Android客户端 |
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不知你用的HPLC条件是什么，从图上来看，采集的保留时间太短，肯定不合适，需大幅度降低有机相比例。按道理说，薄层色谱上rf值差这么大，正相色谱柱是能分开的，用梯度洗脱，耐心点，起始梯度降低，使第一个点的Rf不要超过0.2。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2016-11-11 12:35:05
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hplc有尝试用甲醇水35%，30%，20%，乙腈20%，10%，结果都在10min以内出峰，均显示单峰，用的柱子是C18反相柱，第一个薄层板是用氯仿:甲醇7:3跑的，分的还可以，8:2的rf值在0.1左右，是否应该用介于7:3和8:2之间的比例做洗脱剂上硅胶柱呢？ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-11-11 15:00:26
4楼2016-11-11 16:34:10
5楼2016-11-11 16:49:02
tjfno1
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你液相看的那个波长，你的样品254下没吸收，在液相上254nm，肯定也没有吸收，你液相要看末端吸收，看看是不是两个峰。或者有可能你样品没有紫外吸收，要过个硅胶小柱子。摸一个能把第一个点洗下来，第二个点在原点不动的条件洗脱，边洗脱边检测，拿到第一个点，然后加大比例拿到第二个点。但要注意过柱子的试剂要用干净的，分析纯的试剂中有杂志，你的样品量小有可能收到试剂污染，过完珠子之后更不纯了。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-11-12 09:49:22
52songshuang
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7楼2016-11-12 09:53:50
8楼2016-11-12 10:04:39
永buyanqi
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9楼2016-11-12 10:18:22
tjfno1
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硅胶柱应该是能分开的，过起来比较费劲，不能接的太粗，还要实时检测，检测的时候不用展开直接在原点喷显色剂看看有没有要的东西。刮板也比挺麻烦，紫外下没吸收，喷显色剂，要直喷一小条儿，操作起来感觉也比较费劲。楼主这种情况我之前跑过小硅胶柱，没刮过板。总之样品量很小了，楼主操作的时候要小心。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-11-12 10:35:55