应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » western blot问题求教
261/3返回列表123下一页
查看: 1884  |  回复: 25
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

18843419153

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot问题求教 已有3人参与

最近做植物western。前期的工作都不错。转膜是200MA 1.5小时 抗体是45kd的action。二抗是hrp的。可是最后用化学发光成像仪看就是这样的。很苦恼。求解释。或者可以给我一个做过的全步骤也好。 麻烦各位兄弟姐妹了

western blot问题求教


western blot问题求教-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-11-04 16:36:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

段李晓彤

银虫 (正式写手)

院士虫
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-05 22:49:34
我们用的湿转300ma，50分钟，是不是显影液错了，或者一抗二抗用错了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-11-05 08:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18843419153

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 段李晓彤 at 2016-11-05 08:06:25
我们用的湿转300ma，50分钟，是不是显影液错了，或者一抗二抗用错了

我用的是ecl化学发光。  试剂盒1:1配的 能看到marker是显影液的事吗？ 抗体选的是内参蛋白抗体。可是没做出来。 很郁闷。 天天查也没有个所以然啊。 能不能是转膜过了啊。 还有抗体稀释液也没有啥要求。 我一抗二抗用的是我们实验室别人做组织免疫用的买的抗体稀释液。这个问题大不大

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-11-05 09:01:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)
检actin很容易。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
4楼2016-11-05 22:32:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)
换抗体吧

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
5楼2016-11-05 22:32:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18843419153

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-05 22:32:52
换抗体吧

我是新换的抗体啊。 会是抗体的问题吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-11-06 08:55:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by 18843419153 at 2016-11-06 08:55:51
我是新换的抗体啊。 会是抗体的问题吗？
...

我们用的是西格玛的一抗，一比一万稀释，红外二抗。既然你用的是hrp，可以试试DAB显色

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-11-06 09:51:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18843419153

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-06 09:51:50
我们用的是西格玛的一抗，一比一万稀释，红外二抗。既然你用的是hrp，可以试试DAB显色
...

哦哦。 我现在就是不知道到底是实验步骤的问题还是说是别的什么问题。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-11-06 14:10:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyu6655

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-08 07:13:46
本帖内容被屏蔽
9楼2016-11-06 14:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18843419153

新虫 (初入文坛)
哦哦  这样啊  蛋白提取完没定量  就是跑了电泳  在胶上考染完以后是有条带的啊  会是蛋白提取的问题吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-11-06 14:13:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 18843419153 的主题更新
261/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315（英一）求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 085602 289分求调剂 +7 WWW西西弗斯 2026-03-24 7/350 2026-03-25 14:28 by 3Strings
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +6 @taotao 2026-03-19 6/300 2026-03-25 08:37 by 木托莫露露
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +3 哈哈157349 2026-03-21 3/150 2026-03-24 14:11 by zhyzzh
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭