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18843419153

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by liyu6655 at 2016-11-06 14:10:51
做之前样品有没有进行蛋白定量？ Marker出来了，应该转膜问题不大。内参和你的目的蛋白都没有，两个一抗都出问题的可能性也不是很大，所以个人认为问题最可能出在蛋白提取、二抗和显色液上。

哦哦  这样啊  蛋白提取完没定量  就是跑了电泳  在胶上考染完以后是有条带的啊  会是蛋白提取的问题吗？

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11楼2016-11-06 14:13:36
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lz0308

木虫 (正式写手)
有阳性对照么

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我是一只小小小小乌龟，爬啊爬啊爬啊爬、、、、、
12楼2016-11-07 16:11:33
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liyu6655

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
13楼2016-11-07 19:40:34
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感觉你这不是化学发光成像仪应该给出的图像啊，你确定你没选错参数？
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
14楼2016-11-08 02:48:30
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787719259

银虫 (小有名气)
你的一抗actin是鼠抗吗

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15楼2016-11-08 15:06:44
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star013

新虫 (知名作家)
我们可以提供wb技术服务

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16楼2016-11-08 17:05:05
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曹星辰

新虫 (初入文坛)
mark出来了感觉转膜过程应该不存在问题，首先，可能是你的蛋白质降解了，可以再跑一次胶，跑完之后用卡马斯亮蓝染色，一染就知道你的蛋白质有没有问题了，如果蛋白质没有问题可能就是你的抗体出问题了，但是个人觉得两个抗体同时出问题的概率不大，再其次就是你的显影液有问题，或者自己实验过程中出了问题

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17楼2016-11-08 17:22:29
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18843419153

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by lz0308 at 2016-11-07 16:11:33
有阳性对照么

没有啊。  我也是个新手。有些还不是太懂

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18楼2016-11-11 15:09:58
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18843419153

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 曹星辰 at 2016-11-08 17:22:29
mark出来了感觉转膜过程应该不存在问题，首先，可能是你的蛋白质降解了，可以再跑一次胶，跑完之后用卡马斯亮蓝染色，一染就知道你的蛋白质有没有问题了，如果蛋白质没有问题可能就是你的抗体出问题了，但是个人觉得 ...

嗯。 我之前的胶也跑了sds。而且也有条带。 但是不是特别的亮。 我的实验步骤也是查了很久才决定的。  现在就僵在这了

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19楼2016-11-11 15:11:17
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18843419153

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by liyu6655 at 2016-11-07 19:40:34
你的目的蛋白是在核里还是在浆里？提取方法是否合适？

其实我也不太清楚。 我就是在做前期实验。做的是榛子的。 我就是取叶片。完了液氮磨完加入提取液后放了几个小时。完了离心。取上清

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20楼2016-11-11 15:13:31
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