24小时热门版块排行榜    

查看: 1842  |  回复: 25
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

18843419153

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot问题求教 已有3人参与

最近做植物western。前期的工作都不错。转膜是200MA 1.5小时 抗体是45kd的action。二抗是hrp的。可是最后用化学发光成像仪看就是这样的。很苦恼。求解释。或者可以给我一个做过的全步骤也好。 麻烦各位兄弟姐妹了

western blot问题求教


western blot问题求教-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18843419153

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 曹星辰 at 2016-11-08 17:22:29
mark出来了感觉转膜过程应该不存在问题,首先,可能是你的蛋白质降解了,可以再跑一次胶,跑完之后用卡马斯亮蓝染色,一染就知道你的蛋白质有没有问题了,如果蛋白质没有问题可能就是你的抗体出问题了,但是个人觉得 ...

嗯。 我之前的胶也跑了sds。而且也有条带。 但是不是特别的亮。 我的实验步骤也是查了很久才决定的。  现在就僵在这了

发自小木虫IOS客户端
19楼2016-11-11 15:11:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

段李晓彤

银虫 (正式写手)

院士虫


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-05 22:49:34
我们用的湿转300ma,50分钟,是不是显影液错了,或者一抗二抗用错了

发自小木虫Android客户端
2楼2016-11-05 08:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18843419153

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 段李晓彤 at 2016-11-05 08:06:25
我们用的湿转300ma,50分钟,是不是显影液错了,或者一抗二抗用错了

我用的是ecl化学发光。  试剂盒1:1配的 能看到marker是显影液的事吗? 抗体选的是内参蛋白抗体。可是没做出来。 很郁闷。 天天查也没有个所以然啊。 能不能是转膜过了啊。 还有抗体稀释液也没有啥要求。 我一抗二抗用的是我们实验室别人做组织免疫用的买的抗体稀释液。这个问题大不大

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-11-05 09:01:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)

4楼2016-11-05 22:32:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见