应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 细菌 16S rRNA 测序 双峰
111/2返回列表12下一页
查看: 5342  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

15516735873

新虫 (初入文坛)

[求助] 细菌 16S rRNA 测序 双峰 已有4人参与

用16S rRNA基因鉴定菌种，凝胶电泳有拖带现象，PCR测序结果总是正向双峰，反向正常，是什么原因，怎么破

细菌 16S rRNA  测序 双峰
W20161014.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
天生我才必有用
1楼 2016-10-18 22:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

那山那水那人

新虫 (初入文坛)
你这初步判断是引物和模板没有结合上，你可以直接拿模板与这个PCR产物一块点样做对照看看

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2016-10-18 22:39:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

那山那水那人

新虫 (初入文坛)
你这应该是2000的maker，16S一般只有1300～1500bp。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-10-18 22:36:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuhaolin3

至尊木虫 (著名写手)
换个测序引物试试

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-10-19 00:02:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

runrain

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
之前好像也遇到过这种情况，我的好些是开始出现杂峰的位置有连续几个G碱基，具体可以咨询测序公司，他们比较有经验。针对这种情况，可以反向单向测通，需要设计引物，不过都可以交给测序公司做，你只要出引物合成的费用。16s单向测通的话，再设计多两个引物就能测通了。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-10-19 09:13:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
纯在突变，常见。
克隆测序。
赞一下 回复此楼
6楼2016-10-19 11:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
内容已删除
赞一下 回复此楼
7楼2016-10-19 15:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kshdd

金虫 (著名写手)
有这种现象发生，具体原因忘记了，换基因吧。gyrB可以考虑

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-10-20 13:40:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyhwjm100

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

测序双峰，表明您的PCR产物不单一，最根本的是您的菌未完全分离，仍有杂菌存在，建议继续划线培养，然后菌P测序检测
赞一下 回复此楼
9楼2016-10-28 19:57:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

二十一业

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wyhwjm100 at 2016-10-28 19:57:31
测序双峰，表明您的PCR产物不单一，最根本的是您的菌未完全分离，仍有杂菌存在，建议继续划线培养，然后菌P测序检测

我也觉得是PCR产物不单一，导致不单一的情况，可能是有杂菌，也可能是纯菌，只是菌基因组中有多拷贝的16S核糖体序列，并且这些拷贝不完全一样。
赞一下 回复此楼
10楼2016-11-04 11:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 15516735873 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +7 Liwangman 2026-03-15 7/350 2026-03-18 20:08 by walc
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +6 d如愿上岸 2026-03-12 9/450 2026-03-18 19:50 by macy2011
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +4 ioodiiij 2026-03-17 4/200 2026-03-18 12:36 by Linda Hu
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨； 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭