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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

[求助] 盐酸胍变性后的蛋白能直接过镍柱么 已有1人参与

如图几个蛋白均为包涵体,洗涤后,用盐酸胍溶解的,但是不纯,杂带比较明显,能直接用盐酸胍体系上镍柱纯化么,是his标签的,如果不能应该换成什么体系过柱纯化呢?

盐酸胍变性后的蛋白能直接过镍柱么
包涵体.png
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Dionysius

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
wwbqzhj: 金币+20, 有帮助, 这个我只需要纯化包涵体,不需要有活性,金币送你了,谢谢 2016-09-27 08:12:58
用盐酸胍溶解后蛋白是处于变形状态的,直接上镍柱,纯化出来的蛋白也没有活性,最好透析复性后再纯化。
2楼2016-09-26 20:53:46
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古月问你哦

铜虫 (小有名气)

是变性剂,只是比尿素的溶解度高而已,可以直接过镍柱
我就是我,是不一样的烟火
3楼2016-09-27 10:54:37
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eggplant1993

金虫 (小有名气)

可以直接过镍柱,纯化后再进行蛋白复性,不过复性后蛋白活性不会很高
4楼2016-09-27 16:11:40
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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by eggplant1993 at 2016-09-27 16:11:40
可以直接过镍柱,纯化后再进行蛋白复性,不过复性后蛋白活性不会很高

谢谢
5楼2016-09-28 10:27:47
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

那样过柱的时候如果溶液中盐酸胍量没有的话,会可能出现沉淀到柱子上的情况,这个要小心
6楼2016-10-31 17:07:11
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