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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 盐酸胍变性后的蛋白能直接过镍柱么
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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

[求助] 盐酸胍变性后的蛋白能直接过镍柱么 已有1人参与

如图几个蛋白均为包涵体，洗涤后，用盐酸胍溶解的，但是不纯，杂带比较明显，能直接用盐酸胍体系上镍柱纯化么，是his标签的，如果不能应该换成什么体系过柱纯化呢？

盐酸胍变性后的蛋白能直接过镍柱么
包涵体.png
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1楼 2016-09-26 10:21:24
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Dionysius

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wwbqzhj: 金币+20, ★有帮助, 这个我只需要纯化包涵体，不需要有活性，金币送你了，谢谢 2016-09-27 08:12:58
用盐酸胍溶解后蛋白是处于变形状态的，直接上镍柱，纯化出来的蛋白也没有活性，最好透析复性后再纯化。
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2楼2016-09-26 20:53:46
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古月问你哦

铜虫 (小有名气)
是变性剂，只是比尿素的溶解度高而已，可以直接过镍柱
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我就是我，是不一样的烟火
3楼2016-09-27 10:54:37
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eggplant1993

金虫 (小有名气)
可以直接过镍柱，纯化后再进行蛋白复性，不过复性后蛋白活性不会很高
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4楼2016-09-27 16:11:40
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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by eggplant1993 at 2016-09-27 16:11:40
可以直接过镍柱，纯化后再进行蛋白复性，不过复性后蛋白活性不会很高

谢谢
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5楼2016-09-28 10:27:47
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)
那样过柱的时候如果溶液中盐酸胍量没有的话，会可能出现沉淀到柱子上的情况，这个要小心
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6楼2016-10-31 17:07:11
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