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铜虫 (初入文坛)

[求助] 稀释平板涂布法 已有1人参与

各位大虫们好,我想请教下关于平板涂布法的一些问题。首先,我想说下,我要的只是分离,不需要计数,现在我已经培养出了一批,整体来说,浓度梯度的效果还是出来了,但是,我的所有培养皿上的菌都是充满整个培养皿的,接下来,我想要在此基础上再制备细菌悬浮液再次涂布,这个时候是应该选稀释度小的吗?还有制备悬浮液的具体步骤是什么?求大神指导下,谢谢!
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one_dance

新虫 (初入文坛)

培养皿被菌充满说明浓度太高了呀,你要分离的话还是需要再稀释。我做的话是一块板子有二十来个单菌落就可以了,这样很容易区分。 还有那个悬浮液是什么不太懂,是菌液么?

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2楼2016-09-09 11:17:46
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CC-Brandy

金虫 (小有名气)

如果你已经培养出来了,只是想要单菌落,不是计数的话,可以挑平板上的菌落直接划线。

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学到老活到老
3楼2016-09-09 14:11:36
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一飞天地

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只是想要单菌落,挑单克隆就好
追求
4楼2016-09-09 15:02:59
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雪白的双子

木虫 (正式写手)

制备菌悬液的话,配制液态培养基,高压灭菌之后,冷却60℃左右,在接种一环平板上的菌落,然后适当温度培养适当时间即得到菌悬液,平板如果是保存在冰箱里面的话,需要先放到超净工作台里回温1h左右,在挑去菌落,要不挑取菌落会少,另外就是平板最好是最近的,防止菌的活性下降

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5楼2016-09-09 17:16:28
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铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 雪白的双子 at 2016-09-09 17:16:28
制备菌悬液的话,配制液态培养基,高压灭菌之后,冷却60℃左右,在接种一环平板上的菌落,然后适当温度培养适当时间即得到菌悬液,平板如果是保存在冰箱里面的话,需要先放到超净工作台里回温1h左右,在挑去菌落,要 ...

好的,谢谢,很有帮助

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6楼2016-09-12 16:36:34
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铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by one_dance at 2016-09-09 11:17:46
培养皿被菌充满说明浓度太高了呀,你要分离的话还是需要再稀释。我做的话是一块板子有二十来个单菌落就可以了,这样很容易区分。 还有那个悬浮液是什么不太懂,是菌液么?
...

是的,这个四楼回答了,多谢

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7楼2016-09-12 16:37:14
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铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by CC-Brandy at 2016-09-09 14:11:36
如果你已经培养出来了,只是想要单菌落,不是计数的话,可以挑平板上的菌落直接划线。

嗯嗯,谢谢

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8楼2016-09-12 16:37:32
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夏日的风2007

新虫 (正式写手)

三区或者四区划线  只要菌种纯 不用稀释 也可以得到单菌落

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9楼2016-09-13 22:45:18
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点瓣心音

木虫 (小有名气)

10楼2016-09-14 01:01:43
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