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米曲霉淀粉酶

铜虫 (小有名气)

[求助] 如何让固体培养基凝固的慢点

本人最近在做芽孢杆菌(兼性厌氧菌)的计数实验,因为要强调活菌的数目,就没用血清板计数,因此用了倾注法平板计数(查论坛了解到涂布法不太准)

(1)先加稀释好的菌液0.1ml到平板里,然后倾注冷却到50度左右的培养基,可是培养基凝固的太快了,一次做不了几个,有什么办法能让培养基凝固的慢点?少加点琼脂行吗?
(2)a把菌液加到空平板里,再到培养基晃匀
         b先在空平板里到一层培养基凝固后,接着加菌液,再到培养基摇晃均匀
        两种方法哪个更好点呢 ?

求 高手指点啊!!急啊!!在线等!!不胜感激!!
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
米曲霉淀粉酶: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-11-25 14:34:30
可以考虑双层培养基嘛,你的上层培养基可以把琼脂调低点,0.7%-1%都没问题
应该是培养基瓶子放50度水浴锅里面,这样撑十多分钟二十分钟没问题~
而且菌液是和上层培养基混合之后再倒平板的~你要是先放菌液在培养皿里面再加培养基是肯定混不匀的~

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6楼2012-11-23 08:27:21
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普通回帖

匿名

用户注销 (知名作家)

★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-22 22:37:57
本帖仅楼主可见
2楼2012-11-22 16:34:05
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2012-11-22 22:38:05
提高点儿温度,培养基在水浴锅里保温,是不是可以啊?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-11-22 18:38:17
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小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2012-11-22 22:38:14
琼脂加1.5% ,如果样品较多,可以较高一点温度下倒平板,或将琼脂培养基分成数瓶,分别放在50~60度水浴中,按需使用,
4楼2012-11-22 20:18:06
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-22 22:38:22
可以试着稍微减少下琼脂的量,用刚灭完菌的热平板倒。
5楼2012-11-22 22:01:17
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米曲霉淀粉酶

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-11-23 08:27:21
可以考虑双层培养基嘛,你的上层培养基可以把琼脂调低点,0.7%-1%都没问题
应该是培养基瓶子放50度水浴锅里面,这样撑十多分钟二十分钟没问题~
而且菌液是和上层培养基混合之后再倒平板的~你要是先放菌液在培养皿 ...

我是放50度水浴锅里面保温的,可是拿出来两分钟就会有结块了,就怕先把菌液和上层培养基混合后再倒平板来不及啊,倒出来的平板很难看,总不能把水浴锅搬到超净台里吧

ps:现在是冬天,实验室温度很低,要是开暖空调,调高室温会不会好很多啊

求指点啊
7楼2012-11-23 14:04:40
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txl026

木虫 (正式写手)

linger

灭好后,趁热倒平板,可以用一块紫外消过毒的干净纱布握在瓶口处拿着,我试过,应该不会染菌
Everydayisagift
8楼2012-11-23 14:54:02
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txl026

木虫 (正式写手)

linger

灭好后,趁热倒平板,可以用一块紫外消过毒的干净纱布握在瓶口处拿着,我试过,应该不会染菌
Everydayisagift
9楼2012-11-23 14:55:11
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 米曲霉淀粉酶 at 2012-11-23 14:04:40
我是放50度水浴锅里面保温的,可是拿出来两分钟就会有结块了,就怕先把菌液和上层培养基混合后再倒平板来不及啊,倒出来的平板很难看,总不能把水浴锅搬到超净台里吧

ps:现在是冬天,实验室温度很低,要是开暖 ...

这个~其实我想说的是,你把上层培养基和菌液混合之后,可以放回五十度稍微热一下顺便等气泡消失,因为一般来说五十度对于芽孢杆菌是可以承受的温度~
如果你怕拿出来凝得快,可以拿一烧杯热水把盛放有菌液和培养基的容器水浴着在台子与水浴锅之间转移~
10楼2012-11-23 15:30:34
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