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caikangpeng

金虫 (小有名气)

[求助] 小分子肽(分子量小于5KDa)透析除盐问题 已有2人参与

大家好,小弟最近在做小分析肽透析脱盐的实验,透析buffer是超纯水,透析袋截留分子量100-500Da,solarbio的。问题1:透析过程中常有蛋白聚集沉淀,造成原料损失,请问有什么好办法解决吗?问题2:透析两个礼拜,发现氯化钠还是没有除尽(我是用1 M AgNO3检测透析袋内液体,还是有白色沉淀),透析期间每天换水不少于8次,而且常用透析袋处理方法(于2%碳酸氢钠、1 mmoL EDTA溶液煮沸10min;然后蒸馏水清洗干净,最后1 mmoL EDTA溶液煮沸10min)处理,就怕透析袋吸附杂质,使得透析效果降低。透析这么久了,透析袋损坏好几个(有折痕就容易坏),盐还没除尽。
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elise1987

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个100-500 D 的透析袋根本就没有重金属。。。不能煮的,37摄氏度以下条件使用,你找供应商确认一下

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不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
2楼2016-08-24 15:43:09
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虫四

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好,我最近也在做小分子肽透析,我的肽有6 KDa,透析袋是1 KDa的,透析后蛋白浓度很低。你的沉淀问题,可能是透析溶液浓度变换太大,你设成梯度进行透析呢,很希望共享透析经验。谢谢,很好奇,你为什么透析在纯水中呢,有缓冲体系对蛋白不是更好么

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3楼2016-08-24 16:23:46
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caikangpeng

金虫 (小有名气)

送红花一朵
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2楼: Originally posted by elise1987 at 2016-08-24 15:43:09
这个100-500 D 的透析袋根本就没有重金属。。。不能煮的,37摄氏度以下条件使用,你找供应商确认一下

非常感谢您的回复,配套说明书上表示需要煮一下的,您有用过这款透析袋吗?也是没有煮吗?
4楼2016-08-24 17:00:13
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caikangpeng

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 虫四 at 2016-08-24 16:23:46
你好,我最近也在做小分子肽透析,我的肽有6 KDa,透析袋是1 KDa的,透析后蛋白浓度很低。你的沉淀问题,可能是透析溶液浓度变换太大,你设成梯度进行透析呢,很希望共享透析经验。谢谢,很好奇,你为什么透析在纯水 ...

您好,我的样品是酶解液,溶剂就是水,所以我透析的时候就是用的纯水。您一般是怎样设置梯度透析的,就是盐浓度梯度是怎样设置的?
5楼2016-08-24 17:04:09
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elise1987

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
caikangpeng: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-09-08 13:27:29
引用回帖:
4楼: Originally posted by caikangpeng at 2016-08-24 21:00:13
非常感谢您的回复,配套说明书上表示需要煮一下的,您有用过这款透析袋吗?也是没有煮吗?...

一直在用啊。。。这个透析袋是光谱医学的,索莱宝怎么可能生产得出来,他们只是分装而已。配的说明书也不对的吧,只有廉价透析袋才需要煮。100-500 D的都是好几百块钱一米的啊,即用型的,不用煮,漂洗几下就能用
不折腾,不胡闹,珍惜时间和生命
6楼2016-08-25 09:30:23
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caikangpeng

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by elise1987 at 2016-08-25 09:30:23
一直在用啊。。。这个透析袋是光谱医学的,索莱宝怎么可能生产得出来,他们只是分装而已。配的说明书也不对的吧,只有廉价透析袋才需要煮。100-500 D的都是好几百块钱一米的啊,即用型的,不用煮,漂洗几下就能用...

好吧,这个确实很贵,我发现煮了之后,透析袋没有以前柔软了,谢谢了。
7楼2016-08-25 15:22:16
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愿好_

新虫 (初入文坛)

你好哇,我在透析过程中也出现了蛋白沉淀,这个真的会有影响吗,为什么会造成原料损失呢?
8楼2024-07-13 12:03:05
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