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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 小分子肽（分子量小于5KDa）透析除盐问题
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caikangpeng

金虫 (小有名气)

[求助] 小分子肽（分子量小于5KDa）透析除盐问题 已有2人参与

大家好，小弟最近在做小分析肽透析脱盐的实验，透析buffer是超纯水，透析袋截留分子量100-500Da，solarbio的。问题1：透析过程中常有蛋白聚集沉淀，造成原料损失，请问有什么好办法解决吗？问题2：透析两个礼拜，发现氯化钠还是没有除尽（我是用1 M AgNO3检测透析袋内液体，还是有白色沉淀），透析期间每天换水不少于8次，而且常用透析袋处理方法（于2%碳酸氢钠、1 mmoL EDTA溶液煮沸10min；然后蒸馏水清洗干净，最后1 mmoL EDTA溶液煮沸10min）处理，就怕透析袋吸附杂质，使得透析效果降低。透析这么久了，透析袋损坏好几个（有折痕就容易坏），盐还没除尽。
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1楼 2016-08-23 11:31:14
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elise1987

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个100-500 D 的透析袋根本就没有重金属。。。不能煮的，37摄氏度以下条件使用，你找供应商确认一下
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caikangpeng
不折腾，不胡闹，珍惜时间和生命
2楼2016-08-24 15:43:09
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虫四

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你好，我最近也在做小分子肽透析，我的肽有6 KDa，透析袋是1 KDa的，透析后蛋白浓度很低。你的沉淀问题，可能是透析溶液浓度变换太大，你设成梯度进行透析呢，很希望共享透析经验。谢谢，很好奇，你为什么透析在纯水中呢，有缓冲体系对蛋白不是更好么
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caikangpeng
3楼2016-08-24 16:23:46
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caikangpeng

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by elise1987 at 2016-08-24 15:43:09
这个100-500 D 的透析袋根本就没有重金属。。。不能煮的，37摄氏度以下条件使用，你找供应商确认一下

非常感谢您的回复，配套说明书上表示需要煮一下的，您有用过这款透析袋吗？也是没有煮吗？
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4楼2016-08-24 17:00:13
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caikangpeng

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 虫四 at 2016-08-24 16:23:46
你好，我最近也在做小分子肽透析，我的肽有6 KDa，透析袋是1 KDa的，透析后蛋白浓度很低。你的沉淀问题，可能是透析溶液浓度变换太大，你设成梯度进行透析呢，很希望共享透析经验。谢谢，很好奇，你为什么透析在纯水 ...

您好，我的样品是酶解液，溶剂就是水，所以我透析的时候就是用的纯水。您一般是怎样设置梯度透析的，就是盐浓度梯度是怎样设置的？
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5楼2016-08-24 17:04:09
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elise1987

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
caikangpeng: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-09-08 13:27:29
引用回帖:
4楼: Originally posted by caikangpeng at 2016-08-24 21:00:13
非常感谢您的回复，配套说明书上表示需要煮一下的，您有用过这款透析袋吗？也是没有煮吗？...

一直在用啊。。。这个透析袋是光谱医学的，索莱宝怎么可能生产得出来，他们只是分装而已。配的说明书也不对的吧，只有廉价透析袋才需要煮。100-500 D的都是好几百块钱一米的啊，即用型的，不用煮，漂洗几下就能用
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不折腾，不胡闹，珍惜时间和生命
6楼2016-08-25 09:30:23
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caikangpeng

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by elise1987 at 2016-08-25 09:30:23
一直在用啊。。。这个透析袋是光谱医学的，索莱宝怎么可能生产得出来，他们只是分装而已。配的说明书也不对的吧，只有廉价透析袋才需要煮。100-500 D的都是好几百块钱一米的啊，即用型的，不用煮，漂洗几下就能用...

好吧，这个确实很贵，我发现煮了之后，透析袋没有以前柔软了，谢谢了。
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7楼2016-08-25 15:22:16
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愿好_

新虫 (初入文坛)
你好哇，我在透析过程中也出现了蛋白沉淀，这个真的会有影响吗，为什么会造成原料损失呢？
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8楼2024-07-13 12:03:05
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