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大家看看我这个质粒怎么了 已有5人参与
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大家帮忙看看我这个质粒怎么了，全式金的T载体，大约4000bp，插入片段100bp左右。左边marker第一条带5000bp，第二条3000bp。菌液已经测序是正确的。提了两次总是在100bp左右有条带，可以确定试剂盒没问题。我想用他做定量PCR，扩增是失败的。 发自小木虫Android客户端 |
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3楼2016-08-20 15:39:39
aliaaxmu2016
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建议如下：1.全程冰上做，减少非特异；2.看看能不能找个平行实验做一下？这样谁也不知道什么玩意。3.pcr污染，换掉所有pcr体系。我感觉非特异可能比较大，之前做人的基因组，这个位置总有明亮非特异 发自小木虫Android客户端 |
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leannele4楼2016-08-21 14:59:28
2楼2016-08-20 12:39:47
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梅太奇阿拉干
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你提其他质粒正常吗？是不是裂解时混匀太剧烈了或者裂解时间过长？100bp条带这么亮，不太正常啊。 发自小木虫Android客户端 |
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7楼2016-08-24 17:28:47
8楼2016-08-24 20:35:11
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Rna是非常不稳定的，如果是rna条带周围应该是有一些弥带的，不会是很亮的一条，100bp的片段同浓度下比4000bp片段是暗很多的，你的这个小片段比质粒的条带都亮，说明浓度比质粒还大(正常情况下质粒比rna稳定的多，不可能条带比rna弱)，所以不太正常，而且你也加了RNa酶，所以不太可能是rna,你换一个其他质粒，不含这个重组质粒的菌提一下，看看是不是也这样，如果是，那就可能是你操作或者试剂盒的问题了，如果不是，那就是构建的菌有问题 发自小木虫Android客户端 |
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9楼2016-08-25 11:45:36
10楼2016-08-25 15:49:12