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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 大家看看我这个质粒怎么了
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leannele

金虫 (小有名气)

[交流] 大家看看我这个质粒怎么了 已有5人参与

大家帮忙看看我这个质粒怎么了，全式金的T载体，大约4000bp，插入片段100bp左右。左边marker第一条带5000bp，第二条3000bp。菌液已经测序是正确的。提了两次总是在100bp左右有条带，可以确定试剂盒没问题。我想用他做定量PCR，扩增是失败的。

大家看看我这个质粒怎么了


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1楼 2016-08-20 12:21:46
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leannele

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by aliaaxmu2016 at 2016-08-21 14:59:28
建议如下：1.全程冰上做，减少非特异；2.看看能不能找个平行实验做一下？这样谁也不知道什么玩意。3.pcr污染，换掉所有pcr体系。我感觉非特异可能比较大，之前做人的基因组，这个位置总有明亮非特异
...

谢谢，明天试试

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5楼2016-08-21 22:14:27
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-21 08:03:07
RNA吧？质粒提取试剂盒里加RNase了吗。
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2楼2016-08-20 12:39:47
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leannele

金虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-21 08:03:14
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2016-08-20 12:39:47
RNA吧？质粒提取试剂盒里加RNase了吗。

加了，新买的试剂盒，全式金和天根都用过

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3楼2016-08-20 15:39:39
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aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-08-21 21:52:51
建议如下：1.全程冰上做，减少非特异；2.看看能不能找个平行实验做一下？这样谁也不知道什么玩意。3.pcr污染，换掉所有pcr体系。我感觉非特异可能比较大，之前做人的基因组，这个位置总有明亮非特异

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leannele
4楼2016-08-21 14:59:28
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