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leannele

金虫 (小有名气)

送红花一朵
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9楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-08-25 11:45:36
Rna是非常不稳定的,如果是rna条带周围应该是有一些弥带的,不会是很亮的一条,100bp的片段同浓度下比4000bp片段是暗很多的,你的这个小片段比质粒的条带都亮,说明浓度比质粒还大(正常情况下质粒比rna稳定的多,不 ...

图片这个提取的质粒浓度确实很低。我后边重新摇菌提取的浓度就很高,下边的条带仍然有,跑胶时间延长到35分钟(电压100)的时候就没有了。我感觉从跑胶的情况看还是RNA,不过,这个质粒用着是正常的,后续的PCR扩增很正常

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11楼2016-08-26 15:14:31
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leannele

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by 547star at 2016-08-25 15:49:12
做定量的模板?100bp这么小的片段,大质粒无法判断克隆了没有,还有图片的就像前面的朋友说的应该是RNA。选择质粒越小越好。如果不用测序,建议pUC18用PvuII酶切得到2.3kb的小载体片段,加T后进行TA克隆,筛选白菌落 ...

谢谢,我用M13引物做菌液PCR,筛选的克隆子,测序看是正确的。

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12楼2016-08-26 15:17:29
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