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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 大家看看我这个质粒怎么了
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leannele

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9楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-08-25 11:45:36
Rna是非常不稳定的，如果是rna条带周围应该是有一些弥带的，不会是很亮的一条，100bp的片段同浓度下比4000bp片段是暗很多的，你的这个小片段比质粒的条带都亮，说明浓度比质粒还大(正常情况下质粒比rna稳定的多，不 ...

图片这个提取的质粒浓度确实很低。我后边重新摇菌提取的浓度就很高，下边的条带仍然有，跑胶时间延长到35分钟（电压100）的时候就没有了。我感觉从跑胶的情况看还是RNA，不过，这个质粒用着是正常的，后续的PCR扩增很正常

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11楼2016-08-26 15:14:31
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leannele

金虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by 547star at 2016-08-25 15:49:12
做定量的模板？100bp这么小的片段，大质粒无法判断克隆了没有，还有图片的就像前面的朋友说的应该是RNA。选择质粒越小越好。如果不用测序，建议pUC18用PvuII酶切得到2.3kb的小载体片段，加T后进行TA克隆，筛选白菌落 ...

谢谢，我用M13引物做菌液PCR，筛选的克隆子，测序看是正确的。

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12楼2016-08-26 15:17:29
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