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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 用分光光度计测酶含量，为什么对照颜色浅一点测出来反而是负值？
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回眸谁浅笑72

新虫 (正式写手)
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用分光光度计测酶含量，为什么对照颜色浅一点测出来反而是负值？
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用分光光度计测酶含量，为什么对照颜色浅一点测出来反而是负值？

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1楼 2016-08-10 17:24:38
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Joyand

木虫 (正式写手)
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…一般不都是颜色浅吸光度低吗，比空白浅，当然是负值

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12楼2016-08-10 17:35:43
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千寻的圆舞曲

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
话说我原来也遇到过这问题，真的不太明白，我就随便想了想。楼主是在哪个波长下测的吸光度值，可见光通常指波长范围为:390nm - 780nm 。我想假如测的是紫外光只是靠人眼可见的颜色来判断吸光度大与小看不出吧，看楼主的对照比色杯中是不是也装的酶反应液了，那样的确是浓度越大，反应产生的色物质也越多，吸光度越大，可要是用的另外的参照好像就说不好说了吧。还有是不是那个对照的比色杯中有气泡或者杂物啥的，或者比色杯受光的那一面是不是手碰到了。

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13楼2016-08-10 17:50:46
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回眸谁浅笑72

新虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 千寻的圆舞曲 at 2016-08-10 17:50:46
话说我原来也遇到过这问题，真的不太明白，我就随便想了想。楼主是在哪个波长下测的吸光度值，可见光通常指波长范围为:390nm - 780nm 。我想假如测的是紫外光只是靠人眼可见的颜色来判断吸光度大与小看不出吧，看楼 ...

测定波长是400nm,对照是煮死的酶液，我一直测了很多很多次都是负值

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14楼2016-08-10 18:29:20
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回眸谁浅笑72

新虫 (正式写手)
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12楼: Originally posted by Joyand at 2016-08-10 17:35:43
…一般不都是颜色浅吸光度低吗，比空白浅，当然是负值

对照颜色浅，样品颜色深

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15楼2016-08-10 18:29:59
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千寻的圆舞曲

新虫 (小有名气)
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14楼: Originally posted by 回眸谁浅笑72 at 2016-08-10 18:29:20
测定波长是400nm,对照是煮死的酶液，我一直测了很多很多次都是负值
...

是不是因为底物对于这一波长的光吸收有影响，反应的量少，色产物少，那么底物剩余的多。反之，色产物多，底物少。

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16楼2016-08-10 19:38:42
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回眸谁浅笑72

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16楼: Originally posted by 千寻的圆舞曲 at 2016-08-10 19:38:42
是不是因为底物对于这一波长的光吸收有影响，反应的量少，色产物少，那么底物剩余的多。反之，色产物多，底物少。
...

那怎么解决这个问题呢，减少底物么

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17楼2016-08-10 22:38:07
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千寻的圆舞曲

新虫 (小有名气)
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17楼: Originally posted by 回眸谁浅笑72 at 2016-08-10 22:38:07
那怎么解决这个问题呢，减少底物么
...

额，我是个糊涂虫，帮不了你了。

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回眸谁浅笑72
18楼2016-08-10 23:21:35
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回眸谁浅笑72

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18楼: Originally posted by 千寻的圆舞曲 at 2016-08-10 23:21:35
额，我是个糊涂虫，帮不了你了。
...

嘿嘿，谢谢哦

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19楼2016-08-10 23:36:33
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wpaing513

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对照不加酶液试试

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20楼2016-08-11 09:00:17
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回眸谁浅笑72

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20楼: Originally posted by wpaing513 at 2016-08-11 09:00:17
对照不加酶液试试

对照不加酶液肯定是正的额，但是方法上对照是煮死的酶液

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21楼2016-08-11 09:12:04
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wpaing513

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18楼: Originally posted by 千寻的圆舞曲 at 2016-08-10 23:21:35
额，我是个糊涂虫，帮不了你了。
...

可能是蒸煮条件改变了一些分子结构，实在不行换一个其他方法试试

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22楼2016-08-11 13:19:12
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爱啦啦2楼
2016-08-10 17:24   回复  
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刘亚飞3楼
2016-08-10 17:24   回复  
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黑曼巴19914楼
2016-08-10 17:24   回复  
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xujinjun5楼
2016-08-10 17:24   回复  
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lr9001266楼
2016-08-10 17:24   回复  
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ttjira7楼
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信子小姐8楼
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论坛小虫虫9楼
2016-08-10 17:24   回复  
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jpingl127310楼
2016-08-10 17:24   回复  
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考博1311楼
2016-08-10 17:24   回复  
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