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yuguiyan至尊木虫 (文坛精英)
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[求助]
如何获得有活性的GST融合蛋白呀？
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超声后发现我的目的蛋白在沉淀中，我想要获得有活性的GST蛋白，应该用什么方法呀？多谢！ 发自小木虫Android客户端 |
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小小细胞啊
新虫 (小有名气)
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37℃25℃我一般都是4h(稍微多几个小时影响不大)，你的会不会时间有点短啊，我是试管培养过夜次日转接30mL的小瓶培养基，220r摇，3.5-4诱导，诱导以后再养4h以上，16℃的都是诱导过夜 时间长点也没关系。你的这个短时间我没做过，不知道是不是有影响。也有师姐她们直接在试管里面诱导，个人习惯，也可以做出来，你可以把时间延长试试，做3个温度梯度试试看 发自小木虫Android客户端 |
16楼2016-08-05 22:05:37
2楼2016-07-31 23:39:45
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-08-01 21:45:24
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-08-01 21:45:24
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质粒，宿主菌，外界条件三方面入手。质粒换起来太麻烦，换一个融合蛋白表达能力强的BL21等感受态，优化培养条件，培养时加入IPTG的时间，加入量，诱导后培养的温度，时间。还有一个方法就是添加分子伴侣，促进蛋白二硫键的形成和蛋白的折叠。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-08-01 08:54:58
yuguiyan
至尊木虫 (文坛精英)
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4楼2016-08-01 11:14:06