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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 如何获得有活性的GST融合蛋白呀?

超声后发现我的目的蛋白在沉淀中,我想要获得有活性的GST蛋白,应该用什么方法呀?多谢!

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岳大白

新虫 (初入文坛)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-08-01 21:45:24
质粒,宿主菌,外界条件三方面入手。质粒换起来太麻烦,换一个融合蛋白表达能力强的BL21等感受态,优化培养条件,培养时加入IPTG的时间,加入量,诱导后培养的温度,时间。还有一个方法就是添加分子伴侣,促进蛋白二硫键的形成和蛋白的折叠。

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3楼2016-08-01 08:54:58
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

2楼2016-07-31 23:39:45
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 岳大白 at 2016-08-01 08:54:58
质粒,宿主菌,外界条件三方面入手。质粒换起来太麻烦,换一个融合蛋白表达能力强的BL21等感受态,优化培养条件,培养时加入IPTG的时间,加入量,诱导后培养的温度,时间。还有一个方法就是添加分子伴侣,促进蛋白二 ...

分子伴侣指什么呀

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4楼2016-08-01 11:14:06
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岳大白

新虫 (初入文坛)

一种质粒,同时导入你的宿主菌,它的存在会提高目的基因蛋白表达的活性。具体原理和使用方法,你可以载一些相关文献看看

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5楼2016-08-01 11:25:13
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 岳大白 at 2016-08-01 11:25:13
一种质粒,同时导入你的宿主菌,它的存在会提高目的基因蛋白表达的活性。具体原理和使用方法,你可以载一些相关文献看看

多谢你啦

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6楼2016-08-01 16:26:30
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

7楼2016-08-01 19:38:58
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

8楼2016-08-01 22:38:04
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

9楼2016-08-02 13:32:50
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小小细胞啊

新虫 (小有名气)

一般都是从诱导温度,感受态着手改变

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10楼2016-08-02 19:39:58
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