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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 如何获得有活性的GST融合蛋白呀？
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 如何获得有活性的GST融合蛋白呀？

超声后发现我的目的蛋白在沉淀中，我想要获得有活性的GST蛋白，应该用什么方法呀？多谢！

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1楼 2016-07-31 18:02:25
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岳大白

新虫 (初入文坛)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-08-01 21:45:24
质粒，宿主菌，外界条件三方面入手。质粒换起来太麻烦，换一个融合蛋白表达能力强的BL21等感受态，优化培养条件，培养时加入IPTG的时间，加入量，诱导后培养的温度，时间。还有一个方法就是添加分子伴侣，促进蛋白二硫键的形成和蛋白的折叠。

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3楼2016-08-01 08:54:58
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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2楼2016-07-31 23:39:45
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 岳大白 at 2016-08-01 08:54:58
质粒，宿主菌，外界条件三方面入手。质粒换起来太麻烦，换一个融合蛋白表达能力强的BL21等感受态，优化培养条件，培养时加入IPTG的时间，加入量，诱导后培养的温度，时间。还有一个方法就是添加分子伴侣，促进蛋白二 ...

分子伴侣指什么呀

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4楼2016-08-01 11:14:06
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岳大白

新虫 (初入文坛)
一种质粒，同时导入你的宿主菌，它的存在会提高目的基因蛋白表达的活性。具体原理和使用方法，你可以载一些相关文献看看

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5楼2016-08-01 11:25:13
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 岳大白 at 2016-08-01 11:25:13
一种质粒，同时导入你的宿主菌，它的存在会提高目的基因蛋白表达的活性。具体原理和使用方法，你可以载一些相关文献看看

多谢你啦

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6楼2016-08-01 16:26:30
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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7楼2016-08-01 19:38:58
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
8楼2016-08-01 22:38:04
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
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9楼2016-08-02 13:32:50
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小小细胞啊

新虫 (小有名气)
一般都是从诱导温度，感受态着手改变

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10楼2016-08-02 19:39:58
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