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一起来旅行

银虫 (正式写手)

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[求助] 为啥总反反复复PCR总是扩不出目的条带已有1人参与

刚来的引物第一次摸剃度的时候条带可亮了，但是后来一直重复怎么也扩不出来目的条带，反而引物二聚体特别的亮。然后又重新总trizol提RNA，浓度1000ng/ul，A260/280为1.79,A230/260为0.9，然后逆转录后浓度4000多ng/ul,然后还是按之前的程序跑PCR,结果仍然没有目的条带，表示心很累啊，求大神指导

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端

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1楼 2016-07-23 23:57:11

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安静de执着14

新虫 (著名写手)

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引用回帖:

7楼: Originally posted by 一起来旅行 at 2016-07-24 19:49:32
RNA浓度的1247.1ng/ul,OD值260/280为1.74,230/260为1.05,然后逆转录后的cDNA的浓度4637.6ng/ul,OD值260/280为1.71，230/260为1.97,然后就是扩不出来，真的心累啊

是不是模板浓度过大，你减少模板用量再试试。

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