| 查看: 3349 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
kingjazz23金虫 (小有名气)
|
[求助]
酿酒酵母感受态细胞电击转化 已有1人参与
|
|
|
各位师兄师姐大神好，我现在是研一的学生，因为本科完全没有接触过分子生物学的东西，我本科是读中药学的。导师安排我做萜类的异源表达，用的菌是酿酒酵母BY4741，我之前制备了感受态细胞，但是当时做的时候没有测最终的OD值，就开始做感受态了。后来做完后，就有Bio-rad的电转仪进行电转，然后涂板。在这个过程中，有些问题并不是很清楚，所以想请教一下你们： （1）制备酵母感受态细胞时，最终的OD值是不是一定要达到1.3~1.5之间？超过了会有什么影响？ （2）电转时，我选择的电击杯是0.2的，我参照protocol上写是0.2的电击杯加40u的感受态和5u的DNA样品，混合静置后加入电击杯中，发现量太少了，是不是需要调整一下感受态细胞的用量？还是需要加入山梨醇来增大体积？ （3）电击后，加入1ml的山梨醇，转移到无菌的EP管中后，是否需要孵育一段时间？之前做大肠杆菌的时候是需要孵育的，酵母的话是不是也需要？ （4）涂板后，一般需要多久时间才会长出菌落？一般菌落数是多少？ 问题比较多，希望各路大神帮忙解决一下，谢谢@天使托 |
回复此楼» 猜你喜欢
生物学学硕求调剂
已经有10人回复
-
上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境）
已经有4人回复
-
材料学求调剂
已经有6人回复
-
303求调剂
已经有5人回复
-
一志愿武理085500机械专业总分300求调剂
已经有7人回复
-
考研调剂
已经有4人回复
-
281求调剂
已经有4人回复
-
0805 316求调剂
已经有6人回复
-
085601求调剂总分293英一数二
已经有3人回复
-
08工学调剂
已经有17人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 汉逊酵母电击转化不长啊有人能帮忙分析分析么！！
已经有3人回复
- 酿酒酵母的电转方法
已经有3人回复
- 酿酒酵母高效感受态制备
已经有5人回复
9楼2017-11-24 18:29:00
ls2046
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 25640.8
- 散金: 150
- 红花: 8
- 帖子: 3054
- 在线: 120小时
- 虫号: 350727
- 注册: 2007-04-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2016-07-12 11:58:32
kingjazz23
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 896.1
- 散金: 20
- 帖子: 261
- 在线: 83.1小时
- 虫号: 2581130
- 注册: 2013-08-04
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2016-07-12 18:43:40
kingjazz23
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 896.1
- 散金: 20
- 帖子: 261
- 在线: 83.1小时
- 虫号: 2581130
- 注册: 2013-08-04
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2016-07-16 15:24:18
