应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助，为什么我的DNA电泳一直失败
51/1返回列表
查看: 3834  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

洛一7轮

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，为什么我的DNA电泳一直失败 已有3人参与

是DNA降解了，还是退火温度过低，还是胶的问题。第二天跑，有条带了，但不是我想要的条带。
dna是水煮法提的，pcr是2*Taq,模板，上下引和dd水。变性95度5分钟，退火58度，延伸72度。电泳胶1.5%琼脂糖，dna大小200到500bp,电压90v。
不知道问题出在哪，求大神帮助我这个初入生物分子的人

求助，为什么我的DNA电泳一直失败


求助，为什么我的DNA电泳一直失败-1


@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2016-07-05 14:38:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛一7轮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by baiyu_560 at 2016-07-05 16:09:24
有引物二聚体，说明PCR体系没问题。偶尔能扩出条带，说明DNA模板没提好！水煮法新手难提好！建议用CTAB或SDS常规办法精提DNA试试！可通过电泳检测DNA质量。

能问下如果一定要用水煮法，有没有什么要注意的，因为煮的过程感觉有水蒸气会跑进去

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-07-05 16:14:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

Forest666

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-07 07:35:10
一般PCR完之后放过夜应该是没事的，我一般是在程序的最后设一个20℃，时间无限长，第二天去收结果。看你跑胶的图，DNA没有降解的现象。估计是没扩增出来，不知道你的Marker是多大，我觉得图上的条带有可能是引物。确认你的模板没问题，然后改一下退火温度。
赞一下 回复此楼
ATGC
2楼2016-07-05 15:10:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛一7轮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Forest666 at 2016-07-05 15:10:25
一般PCR完之后放过夜应该是没事的，我一般是在程序的最后设一个20℃，时间无限长，第二天去收结果。看你跑胶的图，DNA没有降解的现象。估计是没扩增出来，不知道你的Marker是多大，我觉得图上的条带有可能是引物。确 ...

marker1004

发自小木虫Android客户端
回复此楼
3楼2016-07-05 15:50:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

洛一7轮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Forest666 at 2016-07-05 15:10:25
一般PCR完之后放过夜应该是没事的，我一般是在程序的最后设一个20℃，时间无限长，第二天去收结果。看你跑胶的图，DNA没有降解的现象。估计是没扩增出来，不知道你的Marker是多大，我觉得图上的条带有可能是引物。确 ...

退火是要升还是降，模板应该没问题，有条带跑出来了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-07-05 15:52:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-16 03:26 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:26 by zNcEhTcH7ihq
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:11 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 18:47 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:50 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-15 16:26 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 15:02 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:25 by VMDqgnlKimtZ
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:13 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:34 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭