| 查看: 1324 | 回复: 7 | ||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||
[求助]
质粒提取 已有3人参与
|
||
| 我之前从别的老师那接了JM109，我所需要的目的基因在其质粒上（Amp抗性），经摇菌并用20%甘油保存、试剂盒提取、1%琼脂糖凝胶电泳显示单一条带（约2500bp），目的基因能扩增出来。但是过了近一个月，我再用之前保存的甘油菌划线、摇菌、试剂盒提取质粒、1%琼脂糖凝胶电泳显示单一条带（近6000bp）。那么问题来了，同一株菌种提取得到的质粒大小竟然不一样，我又做了几次重复，提取出来的质粒大小都是近6000bp，都能扩增出来我所需要的目的基因！我不知道这是什么原因造成的？求大神解答！谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有131人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
kaobo2012
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 100 (初中生)
- 金币: 5426.6
- 散金: 200
- 红花: 15
- 帖子: 731
- 在线: 255.3小时
- 虫号: 1168995
- 注册: 2010-12-13
- 专业: 抗体工程学
5楼2016-06-21 21:50:04
2楼2016-06-21 17:27:07
3楼2016-06-21 17:32:02
4楼2016-06-21 17:33:06
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励积极讨论 2016-06-22 06:55:44
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励积极讨论 2016-06-22 06:55:44
|
1.如果连入外源基因，不大可能2500bp，一般来说；。puc18算是很小的了，也有2.7kb，所以你第一看到的是超螺旋状态，至于大小，肯定比2500大。 2.一般我们提取质粒，看到的是超螺旋的，如果放置时间过长，也可能产生，解螺旋的，也就是好开环的，电泳速度低，但基本不会全部变成解螺旋的。 两次看到的大小不同，个人感觉不大可能是因为构想导致，可能是质粒在大肠杆菌体内形成了二聚体，但这种情况，只是听说过，没有见过。 先进行单酶切看看。 |
6楼2016-06-21 22:20:26
7楼2016-06-21 22:21:43
匿名
用户注销 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1699.5
- 红花: 3
- 帖子: 384
- 在线: 78.5小时
- 虫号: 0
- 注册: 2011-03-13
- 性别: GG
- 专业: 膜生物化学与膜生物物理学
8楼2016-07-27 21:07:33
40