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质粒提取
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夜影行风
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专业: 环境微生物学
[
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质粒提取
已有3人参与
我之前从别的老师那接了JM109,我所需要的目的基因在其质粒上(Amp抗性),经摇菌并用20%甘油保存、试剂盒提取、1%琼脂糖凝胶电泳显示单一条带(约2500bp),目的基因能扩增出来。但是过了近一个月,我再用之前保存的甘油菌划线、摇菌、试剂盒提取质粒、1%琼脂糖凝胶电泳显示单一条带(近6000bp)。那么问题来了,同一株菌种提取得到的质粒大小竟然不一样,我又做了几次重复,提取出来的质粒大小都是近6000bp,都能扩增出来我所需要的目的基因!我不知道这是什么原因造成的?求大神解答!谢谢!
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1楼
2016-06-21 16:38:01
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匿名
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性别: GG
专业: 膜生物化学与膜生物物理学
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8楼
2016-07-27 21:07:33
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选择远方523
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注册: 2014-11-14
专业: 细胞生物学
正常,你单酶切一下再检测。
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2楼
2016-06-21 17:27:07
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夜影行风
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专业: 环境微生物学
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2楼
:
Originally posted by
选择远方523
at 2016-06-21 17:27:07
正常,你单酶切一下再检测。
正常?能说一下可能的原因吗?
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3楼
2016-06-21 17:32:02
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选择远方523
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专业: 细胞生物学
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3楼
:
Originally posted by
夜影行风
at 2016-06-21 17:32:02
正常?能说一下可能的原因吗?...
可能是两个质粒重组了,这事我也遇到过,用酶切一下再看就好了
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4楼
2016-06-21 17:33:06
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