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tanytany

新虫 (初入文坛)

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[求助] 抗体纯化后与抗原不结合已有3人参与

制备的多克隆抗体血清用间接Elisa法测定效价时效价挺高的，用该血清包被去检测抗原OD值很高，但血清经亲和纯化后再去包被去检测抗原时OD值跟阴性对照一样，是什么原因呢？

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1楼 2016-05-19 10:52:29

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lietomepls

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by 159236478 at 2016-05-21 07:52:20
洗脱的时候，ph太低了，抗体已经失活了

洗脱的时候管子里应该加1/10体积的pH 9.0的Tris缓冲液

5楼2016-06-21 09:57:20

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kaobo2012

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

会不会是抗体失活了？

2楼2016-05-19 20:50:27

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hc-material

专家顾问 (职业作家)

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【答案】应助回帖

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要么抗体失活变性，要么辅助因子没了，要么纯化后免疫体系不对，祝顺利

3楼2016-05-20 11:02:24

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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

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专业: 抗体工程学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

洗脱的时候，ph太低了，抗体已经失活了

云山苍苍，江水泱泱，先生之风，山高水长

4楼2016-05-21 07:52:20

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