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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 抗体纯化后与抗原不结合
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tanytany

新虫 (初入文坛)

[求助] 抗体纯化后与抗原不结合 已有3人参与

制备的多克隆抗体血清用间接Elisa法测定效价时效价挺高的，用该血清包被去检测抗原OD值很高，但血清经亲和纯化后再去包被去检测抗原时OD值跟阴性对照一样，是什么原因呢？
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1楼 2016-05-19 10:52:29
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是抗体失活了？
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2楼2016-05-19 20:50:27
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要么抗体失活变性，要么辅助因子没了，要么纯化后免疫体系不对，祝顺利
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3楼2016-05-20 11:02:24
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159236478

至尊木虫 (知名作家)

游来游去之一级游神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
洗脱的时候，ph太低了，抗体已经失活了
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云山苍苍，江水泱泱，先生之风，山高水长
4楼2016-05-21 07:52:20
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lietomepls

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 159236478 at 2016-05-21 07:52:20
洗脱的时候，ph太低了，抗体已经失活了

洗脱的时候管子里应该加1/10体积的pH 9.0的Tris缓冲液
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5楼2016-06-21 09:57:20
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飞雪城飞雪

金虫 (小有名气)
血清测效价的时候你就没有测抑制？

发自小木虫IOS客户端
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6楼2016-06-21 12:34:48
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