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hwj110

新虫 (正式写手)

[交流] EMSA 问题求助 已有5人参与

求助大神
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本人最近在做EMSA，做了2次，但是蛋白和探针电泳后离胶孔很近，蛋白基本就在胶孔以下一大坨，求分析原因~

试剂盒：皮尔斯公司

预电泳条件：100V 1h

电泳：200v 2.5h

缓冲液buffer：0.5*TBE     PH8.3

目前来看转膜是没有问题的，因为marker均转过去了，最大的问题就是蛋白的移动问题

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1楼 2016-05-14 21:41:39
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
★
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你电泳条件是非还原吧？蛋白是不是有多聚体？
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2楼2016-05-14 23:04:49
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展望明天

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
去researchgate里面所搜，里面有比较仔细的说明，从溶液的配置到实验造作的细节都说到一些。
祝好！
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standuporgohome,it'syourfuckingchoice,doyoustillrememberthereasonwhyyouarehere?
3楼2016-05-16 22:12:14
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华工发酵

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的蛋白多大？我最近也在做，我电泳时间也就1.5h,探针离胶孔比较远，蛋白离胶孔比较近，我的蛋白比较大。你看了你的电流没？我电流在正式电泳时也就8mA
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4楼2016-05-17 10:25:05
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star013

新虫 (知名作家)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
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我们公司可以提供EMSA技术服务，您是哪里？
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5楼2016-05-19 07:55:37
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何森森

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我遇到相似的问题，不知道楼主可否分享一下解决方法

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2018-07-23 22:19:31
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