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chicktrick

铁虫 (初入文坛)

[求助] 30金币求助 emsa相关问题 已有3人参与

各位大虾 现在知道emsa是标记dna检测互做蛋白 有没有什么方式可以标记蛋白检测互做dna呢 有文献什么的也请发一下 谢谢各位了
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-05 21:44:48
染色质免疫沉淀分析(ChiP)是基于体内分析发展起来的方法,它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。它能真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的一种很好的方法。
下面这篇文献里有用到CHIP实验,您可以参考一下,确定方法之后,您可以再查找相关文献进一步确定实验方案和细节,希望有帮到您
Proteomic screen defines the hepatocyte nuclear factor 1α-binding partners and identifies HMGB1 as a new cofactor of HNF1α
医学&统计学
2楼2014-12-05 13:26:37
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不需要标记蛋白,跑完胶以后你可以染色蛋白,不过一般条带都很弱
你要是想标记蛋白可以试下FITC或者IAF
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2014-12-06 04:27:36
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chicktrick

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-12-06 04:27:36
不需要标记蛋白,跑完胶以后你可以染色蛋白,不过一般条带都很弱
你要是想标记蛋白可以试下FITC或者IAF

我的意思是指我现在有了通过原核表达得到的蛋白质(转录因子) 有没有什么方法来检测与其互做的DNA呢
4楼2014-12-09 18:58:45
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fificici

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

做chip啊  相当于用抗体标记蛋白了,可以找到靶基因,方法原理什么的网上都有
5楼2015-01-29 09:07:10
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