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hwj110

新虫 (正式写手)

[交流] EMSA 问题求助已有5人参与

求助大神
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本人最近在做EMSA,做了2次,但是蛋白和探针电泳后离胶孔很近,蛋白基本就在胶孔以下一大坨,求分析原因~

试剂盒:皮尔斯公司

预电泳条件:100V 1h

电泳:200v 2.5h

缓冲液buffer:0.5*TBE     PH8.3

目前来看转膜是没有问题的,因为marker均转过去了,最大的问题就是蛋白的移动问题

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kaobo2012

木虫 (正式写手)


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你电泳条件是非还原吧?蛋白是不是有多聚体?
2楼2016-05-14 23:04:49
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展望明天

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
去researchgate里面所搜,里面有比较仔细的说明,从溶液的配置到实验造作的细节都说到一些。
祝好!
standuporgohome,it'syourfuckingchoice,doyoustillrememberthereasonwhyyouarehere?
3楼2016-05-16 22:12:14
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华工发酵

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的蛋白多大?我最近也在做,我电泳时间也就1.5h,探针离胶孔比较远,蛋白离胶孔比较近,我的蛋白比较大。你看了你的电流没?我电流在正式电泳时也就8mA
4楼2016-05-17 10:25:05
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star013

新虫 (知名作家)


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我们公司可以提供EMSA技术服务,您是哪里?
5楼2016-05-19 07:55:37
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何森森

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我遇到相似的问题,不知道楼主可否分享一下解决方法

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2018-07-23 22:19:31
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