24小时热门版块排行榜    

查看: 4637  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yghboy168

银虫 (小有名气)

[求助] pET28a异源表达蛋白切除His标签和T7标签的实验方法 已有3人参与

本人用pET28a异源表达某调控蛋白,要切除His标签和T7标签,以免标签影响蛋白与调控序列的结合,谁能提供相应的具体实验方法啊?谢谢!
回复此楼
眼内有尘三界窄,心头无事一床宽!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yghboy168: 金币+5, 有帮助 2016-05-16 16:31:49
his标签可以用凝血酶切除,另一个不知道,切除后继续用镍柱把标签吸附,蛋白流穿。祝顺利
4楼2016-05-16 10:11:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你要表达后才切除标签吗?表达后切除的话,需要特异的氨基酸序列,有些酶就识别这个序列。我这边用过。
2楼2016-05-14 23:15:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yghboy168

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-05-14 23:15:11
你要表达后才切除标签吗?表达后切除的话,需要特异的氨基酸序列,有些酶就识别这个序列。我这边用过。

是表达后要切除的,你能给我发一下如何切除和再次纯化收集目的蛋白的实验方法吗?非常感谢!
眼内有尘三界窄,心头无事一床宽!
3楼2016-05-15 17:49:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

melyliang

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by yghboy168 at 2016-05-14 17:19:58
本人用pET28a异源表达某调控蛋白,要切除His标签和T7标签,以免标签影响蛋白与调控序列的结合,谁能提供相应的具体实验方法啊?谢谢!

你好,我现在也在做pET28a异源蛋白表达,蛋白也是调控蛋白,对于表达的调控蛋白活性测定,您有什么方法思路吗?研一小白一只,求指教

发自小木虫Android客户端
5楼2017-02-08 17:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见